Hippo-YAP信号通路通过Beclin1调控自噬参与血管平滑肌细胞表型转换的机制研究

目的:探索Hippo-YAP信号通路与自噬在血管平滑肌细胞表型转换中的作用关系及其机制。方法:(1)培养小鼠血管平滑肌细胞(VSMCs),选取第4～8代用于实验，使用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ,1×10^-7mol/L)处理24 h构建VSMCs表型转换模型，对照组细胞以同浓度的二甲基亚砜(DOSO)处理。(2)使用Western Blot、qRT-PCR技术在蛋白质及mRNA水平对YAP,VSMCs表型标志物OPN、α-SMA,以及自噬相关标志物LC3、P62、Beclin1进行检测。(3)分别构建YAP与Beclin1的小干扰RNA(siRNA)对其进行敲减，构建YAP的过表达质粒(pcDNA-YAP)对其进行过表达，使用WB与qRT-PCR验证各基因的表达变化。结果:(1)与对照组相比，AngⅡ处理后VSMCs收缩型标志物α-SMA表达下调、合成型标志物OPN表达上调，YAP及自噬相关标志物LC3Ⅱ、Beclin1表达上调、P62表达下调，在蛋白质及mRNA水平均差异有统计学意义。(2)与对照组相比，YAP siRNA转染后，VSMCs中YAP在蛋白质与mRNA水...