| 重组人瘦素表达及其免疫活性鉴定 |
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| 引用本文： | 王晓辉,颜光涛,薛辉,郝秀华,齐菲. 重组人瘦素表达及其免疫活性鉴定[J]. 标记免疫分析与临床, 2006, 13(4): 231-233 |
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| 作者姓名： | 王晓辉 颜光涛 薛辉 郝秀华 齐菲 |
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| 作者单位： | 解放军总医院基础所生化研究室,北京,100853;解放军总医院基础所生化研究室,北京,100853;解放军总医院基础所生化研究室,北京,100853;解放军总医院基础所生化研究室,北京,100853;解放军总医院基础所生化研究室,北京,100853 |
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| 摘 要： | 为探讨人瘦素(leptin)在大肠杆菌中重组表达的途径,本研究用PCR方法扩增人leptin的编码区(CDS),使产物与pGEM-T easy载体相连,转染DH5α。测序后,选出阳性克隆质粒扩增。将酶切后的leptin片段与pET-28a( )载体连接,获得leptin的表达质粒。将重组表达质粒转入BL21(DE3),测序结果显示leptinCDS没有突变产生,用IPTG诱导人重组(rh)leptin蛋白表达。表达产物进行SDS-PAGE电泳及免疫学分析。结果显示,包涵体在22 kDa蛋白处有明显的新增蛋白带,其含量超过总蛋白的50%;经Western-blot证实为重组的人(rh)leptin。本实验表明:rh-leptin在BL 21(DE3)/pET-28a( )体系中能高效表达,表达产物具有免疫活性。
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| 关 键 词： | 瘦素 克隆 表达 融合蛋白 大肠杆菌 |
| 文章编号： | 1006-1703(2006)04-0231-03 |
| 收稿时间： | 2006-08-04 |
| 修稿时间： | 2006-08-17 |
Cloning and Expression of Recombined Human Leptin with Immunological Activity Evaluation |
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| WANG Xiao-hui, YAN Guang-tao, XUE Hui,et al.. Cloning and Expression of Recombined Human Leptin with Immunological Activity Evaluation[J]. Labeled Immunoassays and Clinical Medicine, 2006, 13(4): 231-233 |
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| Authors: | WANG Xiao-hui YAN Guang-tao XUE Hui et al. |
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| Affiliation: | Research Laboratory of Biochemistry, Basic Medical Institute, General Hospital of PLA, Beijing 100853, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Leptin Cloning Expression Fusion protein E.coli |
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