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人胆囊类器官培养体系的建立与鉴定
引用本文:陈智闻,陈费,刘畅,刘清桂,王紫君,王敏君,李瑶,胡以平. 人胆囊类器官培养体系的建立与鉴定[J]. 海军军医大学学报, 2023, 44(4): 402-408
作者姓名:陈智闻  陈费  刘畅  刘清桂  王紫君  王敏君  李瑶  胡以平
作者单位:复旦大学,海军军医大学,复旦大学,海军军医大学,海军军医大学,海军军医大学,复旦大学,海军军医大学
基金项目:上海市自然科学基金(21ZR1477400),遗传工程国家重点实验室开放课题(SKLGE-1901)
摘    要:目的 构建人胆囊类器官的培养体系,实现人胆囊类器官体外稳定快速扩增,并鉴定其特性。方法 分离人来源胆囊组织上皮细胞,运用三维培养体系将细胞嵌入基质胶中进行3D培养。观察胆囊类器官生长过程中球囊样结构的面积、周长与形态,计算形状因子。利用细胞免疫荧光染色技术检测胆囊类器官的干性标志物CD133、富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5(LGR5)以及胆管上皮细胞标志物肝细胞核因子1β(HNF1β)、上皮细胞黏附分子(Ep CAM)、细胞角蛋白7、细胞角蛋白19、性别决定区Y框9(SOX9)的表达情况。使用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)摄入实验检测小分子CHIR-99021和blebbistatin对类器官增殖特性的影响。结果 胆囊类器官在体外培养过程中,类器官形成的球囊面积逐渐增大,第7天的类器官面积与第1天比较差异有统计学意义(P<0.01),第7天时其形状因子从第1天的0.80(0.75,0.84)增高至0.83(0.81,0.85)(P<0.01),表明类器官在体外稳定生长且形状逐渐趋于一个完美的圆。免疫荧光染色可见类器官表达胆管上皮细胞标志物。在培养基中加入小分子CH...

关 键 词:人胆囊上皮细胞  类器官  干细胞  细胞增殖  胆管上皮细胞
收稿时间:2021-09-24
修稿时间:2022-01-09

Establishment and identification of human gallbladder organoids culture system
CHEN Zhi-wen,CHEN Fei,LIU Chang,LIU Qing-gui,WANG Zi-jun,WANG Min-jun,LI Yao and HU Yi-ping. Establishment and identification of human gallbladder organoids culture system[J]. Academic Journal of Naval Medical University, 2023, 44(4): 402-408
Authors:CHEN Zhi-wen  CHEN Fei  LIU Chang  LIU Qing-gui  WANG Zi-jun  WANG Min-jun  LI Yao  HU Yi-ping
Affiliation:Fudan University,Navy Medical Universtiy,Fudan University,Navy Medical Universtiy,Navy Medical Universtiy,Navy Medical Universtiy,Fudan University,Navy Medical Universtiy
Abstract:
Keywords:human gallbladder organoids   cell proliferation   bile duct epithelial cells
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