TDI-FP技术检测耐乙胺丁醇结核分支杆菌embB306点突变

目的 应用TDI-FP技术分析结核分支杆菌embB 306点突变与乙胺丁醇耐药性的关系，并建立一种准确、快速的诊断结核分支杆菌乙胺丁醇耐药的新方法。方法 对临床82例耐多药结核病患者所感染的结核分支杆菌菌株进行常规培养和药敏实验；提取结核分支杆菌DNA，并PCR扩增205bp的embB基因片段，消化降解掉PCR产物中残余的dNTPs和引物，进行模板指导的荧光标记终止碱基掺入反应；应用Victor2测定反应产物的荧光偏振值，分析所有样品的embB基因306位点的基因型；对分析结果进行测序验证。结果 5例乙胺丁醇高度耐药患者中有3例所感染的结核分支杆菌发生embB 306的ATG→GTG突变；47例乙胺丁醇低度耐药患者中有15例为embB 306突变和未突变的混合感染；30例乙胺丁醇敏感患者的结核分支杆菌未发现embB 306突变。测序结果与实验相符合。结论 embB 306突变与结核分支杆菌对乙胺丁醇产生耐药性密切有关；应用TDI-FP技术可以准确、快速简便检测embB 306突变，在结核分支杆菌耐乙胺丁醇的临床诊断中具有潜在的应用前景。

Detect embB306 gene mutation associated with EMB resistance of M.tuberculosis by TDI-FP technology