基于网络药理学和实验验证探讨白虎加人参汤治疗2型糖尿病的分子机制＊

目的 通过网络药理学方法全面系统筛选白虎加人参汤治疗2型糖尿病（T2DM）的治疗靶点及相关信号通路,并通过动物实验进一步明确其作用机制。方法 应用TCMSP、TCMID和PubChem数据库获取白虎加人参汤的化学活性成分及相关靶点信息,在GEO数据库获得影响T2DM的差异基因,并与白虎人参汤靶点交集获取共同靶点;运用STRING V11.0数据库进行蛋白互作分析并获取蛋白互作网络图及核心靶点;通过DAVID 6.8分析平台,获得GO功能注释结果及KEGG通路富集结果,分析通路相关基因及功能,并通过实验进行验证。选取MKR小鼠24只,随机分为模型组、低剂量白虎加人参汤组、高剂量白虎加人参汤组,各8只,另选取8只同龄同性别FVB小鼠作为对照组。各组给药4周后,测定小鼠空腹血糖（FBG）,采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测小鼠血清中白细胞介素-6（IL-6）、IL-1β、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测PI3K、AKT、NF-κB的蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测PI3K、AKT、NF-κB的mRNA相对表达量。结果 筛选得到白虎加人参汤中101种潜在成分和70个共同靶点,成分-靶点网络图显示白虎加人参汤可能通过VEGFA、FYN、AR、ABL1等蛋白靶点,经由磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）信号通路、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）等信号通路发挥治疗T2DM的作用。动物实验结果显示,与模型组比较,白虎加人参汤降低MKR小鼠空腹血糖及血清中IL-6、IL-1β及TNF-α水平（P<0.05,P<0.01）,下调PI3K/ AKT信号通路上的PI3K、AKT、NF-κB蛋白表达及其mRNA相对表达量（P<0.01）。结论 白虎加人参汤可以通过多成分、多靶点、多通路的作用效应治疗T2DM,实验证实了白虎加人参汤能够下调PI3K/ AKT通路相关蛋白表达及mRNA相对表达量,降低MKR小鼠血糖和血清炎症因子水平,验证了网络药理学结果,为深入研究白虎加人参汤治疗T2DM提供了依据。

Study on the Molecular Mechanism of Baihu and Renshen Decoction in the Treatment of Type 2 Diabetes Based on Network Pharmacology and Experimental Verification