海绵状Ⅰ型胶原蛋白与免脂肪干细胞的生物相容性 |
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引用本文: | 黎洪棉,高建华,鲁峰,李华,陈晓炜,付冰川.海绵状Ⅰ型胶原蛋白与免脂肪干细胞的生物相容性[J].中国组织工程研究与临床康复,2009,13(25). |
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作者姓名: | 黎洪棉 高建华 鲁峰 李华 陈晓炜 付冰川 |
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作者单位: | 1. 中山大学附属中山医院整形美容外科,广东省中山市528403;南方医科大学南方医院整形外科,广东省广州市510515 2. 南方医科大学南方医院整形外科,广东省广州市,510515 |
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摘 要: | 背景:脂肪组织工程研究中,寻找一种优良的生物支架材料作为脂肪干细胞的载体极为重要.目的:评价兔脂肪干细胞与海绵状Ⅰ型胶原蛋白的生物相容性.设计、时间及地点:细胞-支架学体外观察,于2007-01/03在南方医科大学组织工程研究中心完成.材料:三四月龄雌性新西兰大白兔8只,由南方医科大学实验动物中心提供.海绵状Ⅰ型胶原蛋白为广州创尔公司产品.方法:兔麻醉后取颈部皮下脂肪,体外分离培养脂肪干细胞,选取生长良好的第3代细胞,调整密度为1×109L-1细胞悬液.将无菌的Ⅰ型胶原蛋白海绵裁成10mm×10mm×5mm放入96孔板内,培养液平衡后,每孔支架材料表面接种0.1 mL细胞悬液,加入含胎牛血清的DMEM培养液.主要观察指标:脂肪干细胞的形态及表面标志表达,细胞在支架材料上的黏附、增殖情况,光镜及电镜下观察细胞-支架复合物.结果:原代培养的脂肪干细胞形态主要呈宽大扁平短梭形,传代后细胞形态以长梭形为主,第3代脂肪干细胞CD29,CD44免疫荧光染色均呈阳性.细胞与支架混合培养后平均黏附率为92.38%,并保持正常的生长增殖速度.光镜下随培养时间延长,支架上的细胞逐渐增多,极少从支架材料上掉落,Dil荧光染色后可见细胞膜发出红色荧光.电镜下部分细胞呈团簇状生长,聚集性分布,黏附于胶原海绵表面或孔隙内,细胞周围有大量的基质.结论;海绵状Ⅰ型胶原蛋白与兔脂肪干细胞具有良好的体外生物相容性,能够为组织工程种子细胞的生长提供适宜的三维空间,可作为脂肪组织工程种子细胞的载体材料.
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关 键 词: | 组织工程 脂肪干细胞 胶原蛋白 支架 生物相容性 兔 |
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