摘 要: | 目的 :探讨沉默RAS相关结合蛋白25(ras-associated binding protein 25, RAB25)在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞铁死亡中的作用。方法:利用GEPIA (Gene Expression Profiling Interactive Analysis)数据库分析RAB25的表达水平及与铁死亡关键基因表达之间的关联。在CRC细胞系HCT116上构建慢病毒介导的RAB25沉默细胞株(shRAB25),应用定量实时聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)和蛋白印迹法检测RAB25的表达情况。应用细胞增殖与毒性检测法(CCK8)检测不同浓度的(0~20μmol/L)铁死亡诱导剂erastin对沉默RAB25后细胞活力的影响;利用荧光显微镜和透射电镜分别观察erastin对沉默RAB25后的细胞形态和线粒体结构的影响;使用C11-BODIPY染色和流式细胞仪检测erastin对沉默RAB25后的细胞脂膜过氧化水平的影响。检测erastin与西妥...
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