加强型黄色荧光蛋白和VEGF双基因载体在肝细胞共转染表达

目的 构建带加强型黄色荧光素蛋白（VYFP）和人类血管内皮生长因子（VEGF）的双基因真核表达载体pIRES-EYFP/VEGF12,etEYFP作标记基因，研究外源性VEGF121基因在大鼠原代培养肝细胞转染表达，为实时监测VEGF121基因修饰肝组织移植后状态提供基础。方法 将pcDNA3VEGF121中VEGF121定向克隆到pIRES－EYFP，构建重组质粒pIRES－EYFP／VEGF121，经酶切、PCR扩增和部分DNA序列分析证实后，转染大鼠原代培养肝细胞，用荧光显微镜等观察转染表达。结果 酶切、PCR扩增和部分DNA序列分析等证明pIRES－EYFP／VEGF121质粒成功构建，转染大鼠原代培养肝细胞后，可以通过荧光显微镜观察到黄绿色荧光。结论 构建了pIRES－EYFP／VEGF121质粒，为实时监测外源性VEGF121基因转染和VEGF基因修饰肝细胞的基因治疗奠定基础。