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| HRM筛查PROC基因突变方法的建立和应用 | |
| 引用本文： | 沈薇,顾怡,张岚,张纪蔚,应春妹,傅启华. HRM筛查PROC基因突变方法的建立和应用[J]. 现代检验医学杂志, 2012, 27(3): 19-22 |
| 作者姓名： | 沈薇 顾怡 张岚 张纪蔚 应春妹 傅启华 |
| 作者单位： | 1. 上海交通大学医学院附属仁济医院检验科,上海,200127 2. 上海交通大学医学院附属仁济医院血管外科,上海,200127 3. 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心检验科,上海,200127 |
| 基金项目： | 仁济医院第四期学科建设资助项目(项目编号RJ4101309).上海市卫生局青年科研项目 |
| 摘 要： | 目的 利用高分辨率熔解曲线(HRM)结合PCR技术,建立遗传性蛋白C缺陷症患者的蛋白C基基因(PROC)突变筛查方法.方法 收集仁济医院2010年4月～2011年6月收治的9例蛋白C缺陷的静脉血栓患者(经测序PROC基因均已知)及其6例确认有PROC基因缺陷的患者家属DNA标本,通过设计HRM引物,用已知PROC突变的DNA标本进行构建,建立PROC基因外显子1,2,3,7,8突变HRM筛查方法.同时对3例疑似PROC基因缺陷患者,进行该方法的验证.结果 PROC基因外显子1,2,7,8区,突变体与野生型通过HRM图形可进行区分.对3例疑似PROC基因缺陷标本,HRM均筛查出突变,经测序2例为相同外显子7区杂合突变c.565C＞T,合并外显子2区杂合同义突变c.66T＞C,另1例为外显子7区杂合缺失c.577～579del,合并外显子1区多态性位点rs1799810 A＞T.综合统计15例已知标本和3例验证标本,HRM对于PROC基因外显子1,2,7,8区准确度分别为100％,94.4％,100％和91.7％.外显子3区由于缺乏突变病例,无法构建,改为直接测序法.结论 该研究建立了HRM结合直接测序法筛查PROC基因变异的方法.该方法能较快速、方便、经济地筛查PROC变异,适用于遗传性PC缺陷症基因诊断. |
| 关 键 词： | 高分辨率熔解曲线 蛋白C 缺陷 基因 |
Application of High Resolution Melting to Screen the Mutations of PROC Gene |
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| SHEN Wei , GU Yi , ZHANG Lan , ZHANG Ji-wei , YING Chun-mei , FU Qi-hua. Application of High Resolution Melting to Screen the Mutations of PROC Gene[J]. Journal of Modern Laboratory Medicine, 2012, 27(3): 19-22 | |
| Authors: | SHEN Wei GU Yi ZHANG Lan ZHANG Ji-wei YING Chun-mei FU Qi-hua |
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