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| 人偏肺病毒亚克隆的构建与鉴定 | |
| 引用本文： | 刘爱玲,陆学东,吴润香,贾雪.人偏肺病毒亚克隆的构建与鉴定[J].现代检验医学杂志,2012,27(3):26-29. |
| 作者姓名： | 刘爱玲 陆学东 吴润香 贾雪 |
| 作者单位： | 1. 深圳市宝安区龙华人民医院检验科,广东深圳,518109 2. 广东医学院附属深圳福田人民医院检验医学部,广东深圳,518033 3. 北京协和医院基地实验室,北京,100730 |
| 摘 要： | 目的 从临床标本中扩增人偏肺病毒(hMPV)基因片段进行亚克隆,为进一步全面深入地研究人偏肺病毒奠定基础.方法 根据GenBank中已知的hMPV全基因序列设计引物.收集呼吸道感染住院患儿鼻咽抽吸物697例,提取病毒核酸,运用长片段RT-PCR技术扩增目的片段,切割含目的条带的凝胶进行纯化,并将目的片段连接到PJET1.2/blunt克隆载体,转化感受态细胞TOP10,经含氨苄青霉素的抗生素平板筛选,得到阳性克隆,提取质粒,最后对重组质粒进行PCR鉴定和测序鉴定.结果 随机选取5例所获的阳性条带经PCR和测序鉴定,证实确为hMPV基因片段.结论 成功构建了hMPV基因组亚克隆,可用于后续的实验研究. |
| 关 键 词： | 人偏肺病毒 亚克隆 长片段RT-PCR 重组质粒 |
Construction and Identification of Subclones of hMPV |
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| LIU Ai-ling , LU Xue-dong , WU Run-xiang , JIA Xue.Construction and Identification of Subclones of hMPV[J].Journal of Modern Laboratory Medicine,2012,27(3):26-29. | |
| Authors: | LIU Ai-ling LU Xue-dong WU Run-xiang JIA Xue |
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