| 应用芯片式数字PCR检测人血清中登革病毒载量 |
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| 引用本文： | 吴衍恒,林金思,师舞阳,谢颖,杨淑欢. 应用芯片式数字PCR检测人血清中登革病毒载量[J]. 公共卫生与预防医学, 2019, 30(3): 16-20 |
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| 作者姓名： | 吴衍恒 林金思 师舞阳 谢颖 杨淑欢 |
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| 作者单位： | 广东省中山市疾病预防控制中心,广东 中山,528400;广东省中山市疾病预防控制中心,广东 中山,528400;广东省中山市疾病预防控制中心,广东 中山,528400;广东省中山市疾病预防控制中心,广东 中山,528400;广东省中山市疾病预防控制中心,广东 中山,528400 |
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| 基金项目： | 广东省医学科研基金项目 |
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| 摘 要： | 目的建立芯片式数字PCR绝对定量技术,用于登革病例血清中登革病毒载量绝对定量并分析载量变化情况。方法选取发病1~7d登革实验室确诊病例血清样本,提取病毒RNA并逆转录为cDNA,取3μL或4.5μL cDNA,配制15μL反应体系,采用QuantStudio 3D Digital PCR Chip Loader仪器制作芯片,将芯片置于Dual Flat Block GeneAmp PCR System 9700运行PCR,最后在QuantStudio TM 3D Digital PCR System中读取结果并应用QuantStudio^ TM 3D AnalysisSuite TM Software进行分析,根据实验稀释倍数计算血清中登革病毒载量。结果芯片制作良好,有效孔数高,检测结果重复性较好,示病例发病第1~7d血清中的登革病毒载量分别是10^7.646 ,10^7.544 ,10^7.298 ,10^6.990 ,10^5.823 ,10^4.732 ,10^4.221 copies/mL。结论应用芯片式数字PCR检测血清中登革病毒载量的方法可行,可应用于登革病毒载量的绝对定量。登革病毒载量随着病程的发展而降低。
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| 关 键 词： | 登革病毒 病毒载量 数字PCR 芯片 |
Detection of dengue virus load in human serum by chip digital PCR |
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| WU Yanheng,LIN Jinsi,SHI Wuyang,XIE Ying,YANG Shuhuan. Detection of dengue virus load in human serum by chip digital PCR[J]. Journal of Public Health and Preventive Medicine, 2019, 30(3): 16-20 |
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| Authors: | WU Yanheng LIN Jinsi SHI Wuyang XIE Ying YANG Shuhuan |
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| Affiliation: | (Zhongshan Center for Disease Control and Prevention,Zhongshan,Guangdong 528400,China) |
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| Abstract: | WU Yanheng;LIN Jinsi;SHI Wuyang;XIE Ying;YANG Shuhuang(Zhongshan Center for Disease Control and Prevention,Zhongshan,Guangdong 528400,China) |
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| Keywords: | Dengue virus Viral load Digital PCR Chip |
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