| 抗钩虫特异性卵黄抗体的制备与鉴定 |
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| 引用本文： | 王圆圆,廖法学,姚景辉,汪学龙. 抗钩虫特异性卵黄抗体的制备与鉴定[J]. 安徽医科大学学报, 2009, 44(4) |
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| 作者姓名： | 王圆圆 廖法学 姚景辉 汪学龙 |
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| 作者单位： | 安徽医科大学病原生物学教研室,合肥,230032;安徽医科大学病原生物学教研室,合肥,230032;安徽医科大学病原生物学教研室,合肥,230032;安徽医科大学病原生物学教研室,合肥,230032 |
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| 摘 要： | 目的 制备并鉴定特异性抗十二指肠钩虫鸡卵黄免疫球蛋白(IgY),为分析抗钩虫IgY抗体的作用奠定基础.方法 制备十二指肠钩虫成虫粗抗原,经皮下和肌肉注射免疫25周产蛋海兰母鸡3次,每只鸡每次的免疫剂量为200 μg,初次免疫后28 d进行加强免疫,加强免疫间隔时间为10 d.水稀释法提取卵黄中的IgY,盐析、透析法纯化IgY,BCA法测定蛋白含量,并进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blot分析.ELISA法动态检测抗体效价,观察抗体效价变化.结果 免疫后55 d的每个鸡蛋能提取40~55 mg IgY,经SDS-PAGE和Western blot分析,纯化的IgY有2条主带,分子量分别是35 ku和60 ku,即IgY的轻链和重链.初次免疫后10 d左右出现抗体,至免疫后50~55 d为高峰,效价达到1 ∶ 10 000以上.IgY与人血清抗体均可识别30 ku处钩虫抗原.结论 十二指肠钩虫成虫粗抗原免疫的海兰母鸡能产生高浓度、高效价、特异性的IgY抗体,为分析抗钩虫IgY抗体的作用奠定了基础.
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| 关 键 词： | 钩虫病/免疫学 |
Preparation and identification of egg yolk immunoglobulin against ancyloma duodenale |
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