婴儿双歧杆菌介导HSV-TK/GCV自杀基因治疗系统对裸鼠肾细胞癌肿瘤细胞凋亡及NF-κB活性的影响

目的：证实婴儿双歧杆菌（bifidobacterium infantis，BI）介导单纯疱疹病毒胸苷激酶（herpes simplex virus thymidine ki－nase，HSV-TK）/丙氧鸟苷（ganciclovir，GCV）自杀基因系统对裸鼠肾癌的治疗作用，检测其诱导裸鼠肾癌组织细胞凋亡的作用及对核因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）信号通路的影响。方法：引瘤后原代细胞培养注射细胞悬液法建立裸鼠皮下荷瘤肾癌模型，并随机分为BI-pGEX-TK/GCV组（重组质粒组）、BI-pGEX-5X-1/GCV组（空质粒组）、BI/GCV组（空ＢＩ组）和生理盐水/GCV对照组（生理盐水组）。分别经尾静脉注射BI-pGEX-TK、BI-pGEX-5X-1、BI和生理盐水，联合腹腔注射GCV，4周后，称取裸鼠质量及肿瘤质量。TUNEL法检测各组肿瘤细胞凋亡情况，qRT-PCR、Western blot检测各组肿瘤组织Rel A、Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平。结果：（1）重组质粒组荷瘤裸鼠体质量明显高于其余3组（P=0.006），肿瘤组织质量明显降低（P=0.003）。（2）TUNEL法检测发现各组均有不同程度的肿瘤细胞凋亡，以重组质粒组最为明显（P=0.000）。（3）与空质粒组、空BI组及生理盐水组比较，重组质粒组Rel A蛋白表达明显下调（P=0.000），Caspase-3蛋白表达明显上调（P=0.000）。结论：BI介导HSV-TK/GCV自杀基因系统对荷瘤裸鼠肾癌有明显的抑制作用，可能通过影响NF-κB信号通路的活性，诱导荷瘤裸鼠肾癌肿瘤细胞的凋亡，发挥抑癌作用。

Effects of HSV-TK/GCV suicide gene therapy system mediated by bifidobacterium infantis on apoptosis of renal cell carcinoma and activity of nuclear factor kappa B in nude mice