PM诱导支气管上皮细胞炎症反应及内质网应激机制研究

目的探讨细颗粒物（PM）诱导气道炎症中支气管上皮细胞内质网应激（ERS）现象和氧化应激的调控机制。方法雄性C57BL/6小鼠用4mg/kgPM连续气道滴注2d，构建动物模型。获取空白组和PM组小鼠肺组织进行病理分级评分；采用Westernblot法检测肺组织葡萄糖调节蛋白前体78（GRP78）和CCAAT增强子结合蛋白（CHOP）的相对表达量，采用免疫组化法检测GRP78和CHOP的累计光密度值，采用硫代巴比妥酸（TBA）法测定肺组织中丙二醛（MDA）质量摩尔浓度。获取肺泡灌洗液，ELISA法检测IL-6、IL-8和前列腺素E2（PGE2）的分泌水平。用100、200、400mg/LPM和2.5mmol/LN-乙酰半胱氨酸（NAC）、200mg/LPM与支气管上皮细胞BEAS-2B共培养，构建细胞模型。检测各组细胞活性氧（ROS）变化。Westernblot法检测NAC干预下的BEAS-2B中GRP78和CHOP表达变化，ELISA法检测炎症介质分泌水平。结果气道滴注PM诱导C57BL/6小鼠支气管病理形态学改变，肺组织GRP78、CHOP表达升高（P＜0.05），肺组织MDA质量摩尔浓度升高（P＜0.05），伴随肺泡灌洗液中IL-6、IL-8和PGE2分泌增多（P＜0.05）。细胞模型中，PM作用下各组细胞ROS表达水平均升高（均P＜0.05）。NAC干预后细胞ROS表达水平降低（P＜0.05），CHOP/GRP78相对表达量降低（P＜0.05），IL-6、IL-8和PGE2分泌水平降低（P＜0.05）。结论PM诱导的支气管上皮细胞炎症中存在内质网应激现象，其调控机制为氧化应激。