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幽门螺杆菌vacA基因毒性相关片段原核表达载体的构建和表达
引用本文:江红,阎小君,苏成芝,韩锋产,冯永强,侯瑜.幽门螺杆菌vacA基因毒性相关片段原核表达载体的构建和表达[J].细胞与分子免疫学杂志,2001,17(3):237-240.
作者姓名:江红  阎小君  苏成芝  韩锋产  冯永强  侯瑜
作者单位:第四军医大学基因诊断技术研究所
摘    要:目的 构建幽门螺杆菌(Hp)vac A基因片段原核表达载体并进行表达。方法 采用PCR技术,扩增Hp vac A基因的1个片段B,并克隆入pGEM-3Zf(-)质粒。测序正确后,再克隆入质粒pRSETA中,构建重组表达载体pRSETA-B。结果 经过转化E.coli BL21 DE3(plysS)后,诱导表达出相对分子质量(Mr)为33000的蛋白。SDS-PAGE分析显示,表达量占全菌总蛋白质的47.8%。清中目的蛋白占全菌总蛋白的10.9%。ELISA和Western blot分析表明,表达蛋白能与免抗Vac A多抗结合。结论 成功地构建原核表达载体pRSETA-B,为进一步探讨该片段的生物学活性,以及临床上通过检测患者血清预测Hp的感染提供了实验依据。

关 键 词:幽门螺杆菌  vac  A基因  原核表达载体  活性测定  构建  表达  胃疾病
文章编号:1007-8738(2001)03-237-04

Construction and expression of the prokaryotic expression vector of Hp vac A gene related segment with vacuolating activity
Abstract:
Keywords:Helicobacter pylori(Hp)  vac A gene  prokaryotic  expression vector  contruction  expression
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