幽门螺杆菌vacA基因毒性相关片段原核表达载体的构建和表达 |
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引用本文: | 江红,阎小君,苏成芝,韩锋产,冯永强,侯瑜.幽门螺杆菌vacA基因毒性相关片段原核表达载体的构建和表达[J].细胞与分子免疫学杂志,2001,17(3):237-240. |
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作者姓名: | 江红 阎小君 苏成芝 韩锋产 冯永强 侯瑜 |
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作者单位: | 第四军医大学基因诊断技术研究所 |
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摘 要: | 目的 构建幽门螺杆菌(Hp)vac A基因片段原核表达载体并进行表达。方法 采用PCR技术,扩增Hp vac A基因的1个片段B,并克隆入pGEM-3Zf(-)质粒。测序正确后,再克隆入质粒pRSETA中,构建重组表达载体pRSETA-B。结果 经过转化E.coli BL21 DE3(plysS)后,诱导表达出相对分子质量(Mr)为33000的蛋白。SDS-PAGE分析显示,表达量占全菌总蛋白质的47.8%。清中目的蛋白占全菌总蛋白的10.9%。ELISA和Western blot分析表明,表达蛋白能与免抗Vac A多抗结合。结论 成功地构建原核表达载体pRSETA-B,为进一步探讨该片段的生物学活性,以及临床上通过检测患者血清预测Hp的感染提供了实验依据。
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关 键 词: | 幽门螺杆菌 vac A基因 原核表达载体 活性测定 构建 表达 胃疾病 |
文章编号: | 1007-8738(2001)03-237-04 |
Construction and expression of the prokaryotic expression vector of Hp vac A gene related segment with vacuolating activity |
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Abstract: | |
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Keywords: | Helicobacter pylori(Hp) vac A gene prokaryotic expression vector contruction expression |
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