| Survivin基因siRNA真核表达载体的构建及其对转染膀胱癌细胞Survivin表达的抑制作用 |
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| 引用本文： | 曹正国,诸禹平,亓林,朱明,吴奎,董晓程,舒启安,肖峻.Survivin基因siRNA真核表达载体的构建及其对转染膀胱癌细胞Survivin表达的抑制作用[J].中华肿瘤防治杂志,2006,13(22):1697-1700. |
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| 作者姓名： | 曹正国 诸禹平 亓林 朱明 吴奎 董晓程 舒启安 肖峻 |
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| 作者单位： | 安徽医科大学附属省立医院泌尿外科,安徽,合肥,230001 |
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| 摘 要： | 目的构建针对Survivin基因的siRNA(smallinterferenceRNA)真核表达载体,并观察其对转染的膀胱癌细胞中Survivin基因表达和细胞凋亡的影响。方法应用siRNA设计软件设计针对Survivin基因的特异性短链寡核甘酸,化学合成后经退火形成双链siRNA模板,通过克隆到质粒pSilencer1.0-U6构建siRNA真核表达载体并用酶切和测序鉴定;然后将其转染人膀胱癌细胞株BIU-87,以反义Survivin寡核甘酸(ASODN)抑制效果为对照,分别采用噻唑蓝(MTT)比色法和DNA原位末端标记(TUNEL)法检测BIU-87细胞生长抑制率(IR)和凋亡指数(AI),半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblot检测BIU-87细胞中SurvivinmRNA及其蛋白的表达。结果酶切和测序证实siRNA真核表达载体构建成功。siRNA对BIU-87细胞的IR和AI(62.14%和33.77%)均分别显著高于ASODN(39.33%和23.98%)和空白对照组(1.98%和3.75%),P均<0.05,SurvivinmRNA及其蛋白相对表达水平均显著低于ASODN和空白对照组。结论构建的siRNA真核表达载体能有效地抑制Sur-vivinmRNA的转录和表达,诱导BIU-87细胞凋亡和抑制细胞生长,为膀胱肿瘤的基因治疗提供新的方法和手段。
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| 关 键 词： | siRNA 膀胱肿瘤 survivin 反义寡核甘酸 细胞凋亡 |
| 文章编号： | 1673-5269(2006)22-1697-04 |
| 收稿时间： | 2005-11-21 |
| 修稿时间： | 2006-03-02 |
Study of construction of siRNA eukaryotic expression vector of Survivin gene and its inhibitory effect on Survivin expression in bladder cancer cells |
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| CAO Zheng-guo,ZHU Yu-ping,QI Ling,ZHU Ming,WU Kui,DONG Xiao-cheng,SHU Qi-an,XIAO Jun.Study of construction of siRNA eukaryotic expression vector of Survivin gene and its inhibitory effect on Survivin expression in bladder cancer cells[J].Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment,2006,13(22):1697-1700. |
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| Authors: | CAO Zheng-guo ZHU Yu-ping QI Ling ZHU Ming WU Kui DONG Xiao-cheng SHU Qi-an XIAO Jun |
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| Institution: | Department of Urology, Anhui Provincial Hospital, Anhui Medical College, Hefei 230001, P. R. China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | siRNA bladder tumor survivin antisense oligonucleotide cell apoptosis |
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