基于CD107a标记流式细胞仪检测NK细胞毒性方法的建立 |
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引用本文: | 龚春香,王长荣,龚卫娟,胡茂志,季明春.基于CD107a标记流式细胞仪检测NK细胞毒性方法的建立[J].实用临床医药杂志,2010,14(7):23-26,31. |
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作者姓名: | 龚春香 王长荣 龚卫娟 胡茂志 季明春 |
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作者单位: | [1]扬州大学医学院免疫学教研室,江苏扬州225001 [2]金坛市人民医院,江苏金坛 213200 [3]扬州大学测试中心,江苏扬州 225001 |
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摘 要: | 目的建立基于CD107a标记、利用流式细胞仪检测NK细胞毒性的方法。方法首先将外周血单个核细胞(PBMCs)与K562细胞以3:1比例混合,2h后加入莫能菌素,1.5h后加入CD107a和CD56标记抗体,流式细胞仪分析CD107a阳性细胞的频率。其次观察CD107a抗体孵育时间、不同效靶比例对CD107a阳性细胞检测的影响。最后观察该方法与传统LDH释放法检测NK细胞毒活性的一致性。结果NK细胞活化后可在其表面检测到高水平表达的CD107a分子,效靶细胞孵育结束后加入CD107a抗体可降低检测背景,低效靶比例同样具有检测敏感性。该方法与LDH释放法的检测结果一致。结论利用CD107a抗体标记检测NK细胞毒活性的方法具有快速、敏感、所需效应细胞少的优点。
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关 键 词: | CD107a NK细胞 毒性 |
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