| 肌钙蛋白Ⅰ的可溶性表达及纯化研究 |
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| 引用本文： | 周梅珍,蒋舒寒,曹林,胡敏进,华子春.肌钙蛋白Ⅰ的可溶性表达及纯化研究[J].东南大学学报(医学版),2009,28(1). |
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| 作者姓名： | 周梅珍 蒋舒寒 曹林 胡敏进 华子春 |
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| 作者单位： | 南京大学,医药生物技术国家重点实验室,江苏,南京,210093 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，江苏省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的: 提高肌钙蛋白Ⅰ(troponin Ⅰ,Tn Ⅰ)在大肠杆菌中的可溶性表达并进行分离纯化.方法和结果: 将质粒CBD-intein/pTWIN1和Tn Ⅰ/pET28a分别用Nco Ⅰ及Xho Ⅰ双酶切,回收.回收后的载体CBD-intein/pTWIN1与Tn Ⅰ片段用T4 连接酶连接,得到重组质粒CBD-intein-Tn Ⅰ/pTWIN1.将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达得到融合蛋白CBD-intein-Tn Ⅰ.经chitin亲和层析和intein介导的融合蛋白自我裂解,纯化得到重组Tn Ⅰ.结论: 通过CBD-intein融合表达系统一步式裂解分离纯化能方便快捷地获得可溶性的Tn Ⅰ.
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| 关 键 词： | 肌钙蛋白I 表达 CBD-intein-TnⅠ chitin亲和层析 |
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