| survivin启动子的克隆及在HeLa细胞中控制GFP特异性表达 |
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| 引用本文： | 吴冰,林芳,刘丽,王燕,张惠中. survivin启动子的克隆及在HeLa细胞中控制GFP特异性表达[J]. 医学争鸣, 2005, 26(12): 1063-1065 |
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| 作者姓名： | 吴冰 林芳 刘丽 王燕 张惠中 |
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| 作者单位： | 第四军医大学唐都医院中心实验室,陕西,西安,710038;第四军医大学唐都医院中心实验室,陕西,西安,710038;第四军医大学唐都医院中心实验室,陕西,西安,710038;第四军医大学唐都医院中心实验室,陕西,西安,710038;第四军医大学唐都医院中心实验室,陕西,西安,710038 |
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| 摘 要： | 目的: 扩增survivin基因启动子并构建带有survivin启动子的pEGFP-N1真核表达载体 ,检测survivin基因启动子在HeLa细胞中的特异表达活性.方法: ①以HeLa细胞基因组DNA为模板,PCR 扩增survivin启动子,回收扩增产物并插入pGEM-TEasy载体(T/Surp),测序鉴定.②分别双酶切 T/Surp载体和不含CMV启动子的pEGFP-N1载体,回收survivin启动子酶切片段及pEGFP-N1酶切线性化片段,连接回收产物构建携带survivin启动子pEGFP-N1真核表达载体(pEGFP-N1/ Surp),酶切鉴定 .③转染HeLa细胞及正常血管内皮细胞ECV304,在荧光显微镜下观察GFP的表达.结果: 酶切及测序证实成功扩增survivin基因启动子,并构建了携带有survivin基因启动子的pEGFP-N1真核表达载体.转染HeLa细胞和正常血管内皮细胞ECV304,在荧光显微镜下见HeLa细胞发出较强的绿色荧光,而在ECV304细胞未见绿色荧光. 结论: 成功克隆的肿瘤特异性survivin启动子在HeLa细胞具有较强的肿瘤特异性启动活性,为进一步开发肿瘤的特异性基因治疗奠定了实验基础.
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| 关 键 词： | survivin 启动区(遗传学) 基因疗法 GFP |
| 文章编号： | 1000-2790(2005)12-1063-03 |
| 修稿时间： | 2004-11-18 |
Molecular cloning of survivin gene promoter and detecting specific expression of GFP in HeLa cell |
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| WU Bing,LIN Fang,LIU Li,WANG Yan,ZHANG Hui-Zhong. Molecular cloning of survivin gene promoter and detecting specific expression of GFP in HeLa cell[J]. Negative, 2005, 26(12): 1063-1065 |
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| Authors: | WU Bing LIN Fang LIU Li WANG Yan ZHANG Hui-Zhong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | survivin GFP |
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