| 野生型/突变型PSD-95真核表达载体的构建及其表达 |
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| 引用本文： | 齐静,邰剑敏,胡书群,侯筱宇. 野生型/突变型PSD-95真核表达载体的构建及其表达[J]. 免疫学杂志, 2007, 23(1): 20-22 |
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| 作者姓名： | 齐静 邰剑敏 胡书群 侯筱宇 |
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| 作者单位： | 徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心,江苏省脑病生物信息重点实验室,江苏,徐州221002;徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心,江苏省脑病生物信息重点实验室,江苏,徐州221002;徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心,江苏省脑病生物信息重点实验室,江苏,徐州221002;徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心,江苏省脑病生物信息重点实验室,江苏,徐州221002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 , 教育部跨世纪优秀人才培养计划 , 江苏省高校自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的 构建野生型和突变型PSD-95(postsynaptic density protein 95)的真核表达质粒载体,并在COS-7细胞系中表达.方法 采用RT-PCR扩增大鼠PSD-95的cDNA,以PSD-95-GW1为模板,以PCR扩增PSD-95序列的突变体Myc-ΔSG(-SH3-GK)和Myc-ΔG(-GK),分别克隆到真核表达载体pcDNA3.1( ).以脂质体法将重组质粒转入COS-7细胞,免疫印迹法鉴定PSD-95及其突变体的蛋白表达.结果 限制性内切酶酶切和测序结果表明,扩增出的野生型/突变型PSD-95基因完全正确;免疫印迹法检测表明,转染的重组质粒能在COS-7细胞中高效表达.结论 构建的PSD-95-pcDNA3.1( )、Myc-ΔSG-pcDNA3.1( )和Myc-ΔG-pcDNA3.1( )重组载体在COS-7细胞系中高效地表达,为深入研究PSD-95在缺血性脑损伤中的作用及机制打下基础.
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| 关 键 词： | PSD-95 真核表达 COS-7细胞 |
| 文章编号： | 1000-8861（2007）01-0020-03 |
| 收稿时间： | 2005-11-15 |
| 修稿时间： | 2006-02-20 |
Construction and expression of wild/mutant PSD-95 eukaryotic expression plasmid vectors |
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| QI Jing,TAI Jian-min,HU Shu-qun,HOU Xiao-yu. Construction and expression of wild/mutant PSD-95 eukaryotic expression plasmid vectors[J]. Immunological Journal, 2007, 23(1): 20-22 |
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| Authors: | QI Jing TAI Jian-min HU Shu-qun HOU Xiao-yu |
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| Affiliation: | Research Center for Biochemistry and Molecular Biology, Jiangsu Key Laboratory for Bioinformation of Brain Disease, Xuzhou Medical College, Xuzhou 221002, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | PSD-95 Eukaryotic expression COS-7 cell |
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