TEM-105编码基因的克隆与原核表达 |
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作者姓名: | 李家斌 李旭 马亦林 俞云松 |
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作者单位: | 1. 310003,杭州,浙江大学医学院附属第一医院传染病科 2. 安徽医科大学第一附属医院传染病科 |
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摘 要: | 由于一种细菌可同时产生多种 β内酰胺酶 ,因此为了避免多种 β内酰胺酶的相互干扰 ,我们应用肉汤稀释法[1] 对产超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs)的 4株肺炎克雷伯菌 (Kpn)的TEM型编码基因进行了原核表达。一、材料和方法1 菌株来源和表型鉴定 :4株临床菌株№ 95、№ 96、№ 10 2和№ 10 6为浙江省台州第一医院内科患者痰标本分离的Kpn。经抑制剂增强的肉汤稀释法[1] 证实为阳性。2 细菌质粒DNA提取与PCR扩增 :采用碱裂解法提取质粒DNA。根据TEM 1D编码基因序列设计的TEM引物序列为 5′ TTAGACGTCAGGTGGCACTT 3′ (76~ 95 )…
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关 键 词: | TEM-105编码基因 克隆 原核表达 β内酰胺酶 |
修稿时间: | 2003-06-10 |
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