| 幽门螺杆菌热休克蛋白60核酸疫苗的构建和免疫原性鉴定 |
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| 引用本文： | 徐灿,李兆申,杜奕奇,屠振兴,龚燕芳,金晶,吴红玉,许国铭. 幽门螺杆菌热休克蛋白60核酸疫苗的构建和免疫原性鉴定[J]. 胃肠病学, 2005, 10(1): 20-23 |
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| 作者姓名： | 徐灿 李兆申 杜奕奇 屠振兴 龚燕芳 金晶 吴红玉 许国铭 |
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| 作者单位： | 第二军医大学长海医院消化内科,200433 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(No.30170427)资助 |
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| 摘 要： | 背景:核酸疫苗是新兴的第三代疫苗。目前幽门螺杆菌(H.pylori)疫苗的研究主要集中在减毒、灭活和亚单位疫苗方面,有关H.pylori核酸疫苗的研究罕见报道。目的:构建含H.pylori热休克蛋白60(hsp60)基因的核酸疫苗,并鉴定其表达蛋白的免疫原性。方法:抽提H.pylori标准菌株CCUG17874基因组DNA为模板,应用聚合酶链反应(PCR)扩增hsp60基因并插入测序载体pUCmT,测定插入的hsp60基因的核苷酸序列。通过一系列酶切、连接反应将hsp60基因克隆入真核表达载体pIRES,然后转化入感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,行酶切和PCR鉴定。采用脂质体法将所构建的重组载体pIRES鄄hsp60转染真核细胞COS鄄7,蛋白质印迹法(Western blotting)检测pIRES鄄hsp60表达蛋白的免疫原性。结果:以H.pylori基因组DNA为模板,PCR扩增出约1 640 bp的hsp60基因片断,测序结果表明其与GenBank中H.pylorihsp60原序列的同源性达98%。酶切和PCR鉴定结果证实hsp60基因已克隆入真核表达载体pIRES,成功构建了含hsp60基因的H.pylori核酸疫苗pIRES鄄hsp60。蛋白质印迹法检测显示经pIRES鄄hsp60转染的COS鄄7细胞在约60 kDa(1 Da=0.992 1 u)处出现特异性蛋白条带。结论:成功构建了具有免疫原性的含hsp60基因的H.pylori核酸疫苗,为进一步探索其免疫作用奠定了
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| 关 键 词： | 螺杆菌 幽门 疫苗 DNA 遗传载体 热休克蛋白60 |
| 修稿时间： | 2004-02-09 |
Construction of Nucleic Acid Vaccine of Helicobacter pylori Heat Shock Protein 60 Gene and Identification of its Immunogenicity |
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| XU Can,LI Zhaoshen,DU Yiqi,TU Zhenxing,GONG Yanfang,JIN Jing,WU Hongyu,XU Guoming. Construction of Nucleic Acid Vaccine of Helicobacter pylori Heat Shock Protein 60 Gene and Identification of its Immunogenicity[J]. Chinese Journal of Gastroenterology, 2005, 10(1): 20-23 |
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| Authors: | XU Can LI Zhaoshen DU Yiqi TU Zhenxing GONG Yanfang JIN Jing WU Hongyu XU Guoming |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Helicobacter pylori Vaccines DNA Genetic Vectors Heat Shock Protein 60 |
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