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复制缺陷型腺病毒AdE1CMV-NGF的制备
引用本文:刘世全 张薇 贾东辉 王申五 郑姝颖 王薇 张惠蓉. 复制缺陷型腺病毒AdE1CMV-NGF的制备[J]. 首都医科大学学报, 2001, 22(1): 24-26
作者姓名:刘世全 张薇 贾东辉 王申五 郑姝颖 王薇 张惠蓉
作者单位:刘世全(北京医科大学人民医院中心实验室)      张薇(北京医科大学人民医院中心实验室)      贾东辉(北京医科大学人民医院中心实验室)      王申五(北京医科大学人民医院中心实验室)      郑姝颖(北京医科大学人民医院中心实验室)      王薇(北京医科大学人民医院中心实验室)      张惠蓉(北京医科大学人民医院中心实验室)
基金项目:北京市自然科学基金!资助项目 (7972 0 18)
摘    要:通过DNA重组技术 ,经亚克隆和克隆过程构建分泌表达型重组腺病毒穿梭质粒pAdE1CMV NGF ;制备完整高纯度辅助病毒 pJM1 7。将 pAdE1CMV NGF和 pJM1 7在 2 93细胞中同源重组 ,获得复制缺陷型腺病毒重组体AdE1CMV NGF。梯度系列稀释测得滴度为 4 .6× 1 0 10 PFU/mL。

关 键 词:NGF基因  腺病毒载体  基因转移  同源重组
收稿时间:2000-01-29
修稿时间:2000-01-29

The Preparation of Replication-deficient Reco mbinant Adenovirus AdE1CMV-NGF
Liu Shiquan,Zhang Wei,Jia Donghui,Wang Shenwu,Zheng Shuying,Wang Wei,Zhang Huirong. The Preparation of Replication-deficient Reco mbinant Adenovirus AdE1CMV-NGF[J]. Journal of Capital Medical University, 2001, 22(1): 24-26
Authors:Liu Shiquan  Zhang Wei  Jia Donghui  Wang Shenwu  Zheng Shuying  Wang Wei  Zhang Huirong
Affiliation:1. Center Laboratory, People's Hospital, Beijing Medical University;2. Beijing Friendship Hospital;3. Chinese Academy of Medical Science;4. The Third Clinical College, Beijing Medical University
Abstract:With the DNA recombinant techniques, we constructed a secretable form of adenoviral shuttle plasmid pAdE1CMV-NGF through sub-cloning and cloning steps. And then pAdE1CMV-NGF was cotransfected with pJM17 in 293 cells with the application of FuGENE 6 to produce the replication deficient virions containing the cDNA of interest, AdE1CMV-NGF. The titer reached 4.6×1010 PFU/mL by grade-dilution evaluation.
Keywords:NGF gene  adenovirus vector  gene transfer  homologous recombination
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