一种连接产物—PCR方法用于获知难或不能被克隆的DNA片段 |
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引用本文: | 胡文蓉,罗永能.一种连接产物—PCR方法用于获知难或不能被克隆的DNA片段[J].浙江省医学科学院学报,2000,11(2):18-21. |
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作者姓名: | 胡文蓉 罗永能 |
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作者单位: | [1]普康生物技术股份有限公司 [2]瑞士联邦理工学院微生物学研究所 |
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摘 要: | 目的 为获知难或不能被克隆的DNA片段。方法 建立一种以体外连接产物作为模板底物的取合酶链反应(Ligation-PCR)法,通过染色体酶切消化混合物中目标DNA片段的序列,未知的一端连接于一常用的克隆载体如pMCL200上,利用载体的已知DNA片段序列设计引物与目标DNA片段序列已知一端的引物配对,进而扩增该目标DNA片段并测定其部分序列。然后设计新引物并使用常规PCR方法直接从染色体基因组6.
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关 键 词: | 连接产物 热自养甲烷杆菌 DNA 聚合酶链反应 |
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