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| 含A(H1N1)流感病毒NP基因病毒样颗粒的构建和表达 | |
| 引用本文： | 王云龙,徐桂超,李智涛,孙新城,王国强,昌静峰,李彦霞. 含A(H1N1)流感病毒NP基因病毒样颗粒的构建和表达[J]. 实用医学杂志, 2010, 26(17). DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2010.17.004 |
| 作者姓名： | 王云龙 徐桂超 李智涛 孙新城 王国强 昌静峰 李彦霞 |
| 作者单位： | 1. 河南师范大学生命科学学院,河南省新乡市,453007 2. 河南省生物工程技术研究中心,郑州市,450001 3. 郑州大学,450001 4. 郑州轻工业学院,450002 |
| 摘 要： | 目的:构建并表达含有A(H1N1)流感病毒NP基因片段并可抗RNase降解的病毒样颗粒,作为RT-PCR检测的阳性对照.方法:设计带有Nco Ⅰ、BamHⅠ酶切位点的引物克隆MS2噬菌体的装配蛋白和包膜蛋白基因,化学合成含BamH Ⅰ和Hind Ⅲ酶切位点的A(H1N1)流感病毒NP基因片段,将这些基因连接到质粒载体pET-28b(+)上,转化到E.coli BL21(DE3)感受态细胞中进行表达,表达产物进行纯化,然后进行RNase攻击试验和稳定性试验.结果:获得含NP基因片段的病毒样颗粒,可抵抗RNase降解,并能在37℃稳定保存30 d.结论:该病毒颗粒稳定、安全、可靠,可作为A(H1N1)流感病毒RT-PCR检测、定量分析的有效阳性参考品. |
| 关 键 词： | 流感病毒A型,H1N1亚型 阳性对照 病毒样颗粒 核糖核酸酶 |
Construction and expression of virus-like particles containing NP gene of influenza virus A (H1N1) |
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| WANG Yun-long,XU Gui-chao,LI Zhi-tao,SUN Xin-cheng,WANG Guo-qiang,CHANG Jing-feng,LI Yan-xia. Construction and expression of virus-like particles containing NP gene of influenza virus A (H1N1)[J]. The Journal of Practical Medicine, 2010, 26(17). DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2010.17.004 | |
| Authors: | WANG Yun-long XU Gui-chao LI Zhi-tao SUN Xin-cheng WANG Guo-qiang CHANG Jing-feng LI Yan-xia |
| Abstract: | |
| Keywords: | RT-PCR |
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