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E2F-1基因反转录病毒载体的构建及其对人胃癌细胞MGC-803增殖的影响
引用本文:钱倩,李雷,王晓通,苑汐子,谢玉波,肖强.E2F-1基因反转录病毒载体的构建及其对人胃癌细胞MGC-803增殖的影响[J].肿瘤,2010,30(5).
作者姓名:钱倩  李雷  王晓通  苑汐子  谢玉波  肖强
作者单位:1. 广西医科大学第一附属医院,胃肠腺体外科,南宁,530021
2. 广西医科大学第一附属医院,麻醉科,南宁,530021
摘    要:目的:通过构建人同源基因E2F-1反转录病毒表达载体,观察E2F-1过表达对胃癌细胞MGC-803增殖的影响.方法:应用基因重组技术将E2F-1基因克隆到反转录病毒载体pLXSN中,并将经酶切和RT-PCR检测正确的重组载体转染PA317包装细胞,收集病毒上清液感染胃癌细胞MGC-803.应用 RT-PCR和Western印迹法检测MGC-803/pLXSN-E2F-1细胞中E2F-1 mRNA和蛋白的表达情况.应用克隆形成实验和MTT法检测细胞的增殖情况.结果:经酶切和RT-PCR检测结果显示,成功构建E2F-1反转录病毒表达载体.与MGC-803和MGC-803/pLXSN组相比, MGC-803/pLXSN-E2F-1组E2F-1 mRNA和蛋白的表达明显上调(P<0.05).MGC-803/pLXSN-E2F-1组的克隆形成率为48%,明显低于MGC-803组的81%和MGC-803/pLXSN组的77%,差异有统计学意义(P<0.01).MGC-803/pLXSN-E2F-1组的细胞增殖率明显慢于MGC-803组和MGC-803/pLXSN组(P<0.01).结论:成功构建了E2F-1基因过表达的反转录病毒表达载体,并将其成功感染MGC-803细胞,E2F-1过表达可抑制MGC-803细胞的增殖.

关 键 词:胃肿瘤  反转录病毒科  基因表达  细胞增殖  基因  E2F-1  细胞  MGC-803

Construction of retroviral expression vector of E2F-1 gene and its effect on proliferation of gastric cancer cell line MGC-803
QIAN Qian,LI Lei,WANG Xiao-tong,YUAN Xi-zi,XIE Yu-bo,XIAO Qiang.Construction of retroviral expression vector of E2F-1 gene and its effect on proliferation of gastric cancer cell line MGC-803[J].Tumor,2010,30(5).
Authors:QIAN Qian  LI Lei  WANG Xiao-tong  YUAN Xi-zi  XIE Yu-bo  XIAO Qiang
Abstract:
Keywords:
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