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杀菌蛋白DNA改组的初步研究
引用本文:徐俊杰,童贻刚,徐静,安小平,陈万荣,刘树玲,王海涛.杀菌蛋白DNA改组的初步研究[J].中华微生物学和免疫学杂志,2003,23(3):161-164.
作者姓名:徐俊杰  童贻刚  徐静  安小平  陈万荣  刘树玲  王海涛
作者单位:100071,北京,军事医学科学院微生物流行病研究所
摘    要:目的:运用DNA家族改组方法提高杀菌蛋白(BPI23)的杀菌活性。方法:首先将人、猴、兔BPI23基因的PCR产物等量混合,用DNAase I消化,回收50bp左右的片段,再经无引物和有引物2步PCR反应获得与原基因大小相同的改组分子,将其与载体连接获得改组文库。应用Flp-In^TM定点整合表达系统,将BPI23改组文库插入CHO细胞基因组中1个单拷贝位点,分别检测各个细胞克隆的杀菌活性,从中筛选高活性的BPI23改组分子。结果:经过2轮改组和筛选,共获得4个活性高于人BPI23约4倍的克隆,它们与人BPI23基因有7-13个氨基酸的变化。结论:探索了CHO系统中进行DNA改组和筛选的方法与技术路线,成功进行了杀菌蛋白的改组,并为其它分子的改组提供了借鉴。

关 键 词:杀菌蛋白  DNA改组  定点整合
修稿时间:2002年10月20

Preliminary study on DNA shuffling of bactericidal/permeability-increasing protein
XU Jun-jie,TONG Yi-gang,XU Jing,AN Xiao-ping,CHEN Wan-rong,LIU Shu-ling,WANG Hai-tao.Preliminary study on DNA shuffling of bactericidal/permeability-increasing protein[J].Chinese Journal of Microbiology and Immunology,2003,23(3):161-164.
Authors:XU Jun-jie  TONG Yi-gang  XU Jing  AN Xiao-ping  CHEN Wan-rong  LIU Shu-ling  WANG Hai-tao
Institution:XU Jun-jie,TONG Yi-gang,XU Jing,AN Xiao-ping,CHEN Wan-rong,LIU Shu-ling,WANG Hai-tao. Institute of Microbiology and Epidemiology,Academy of Medical Military Sciences,Beijing 100071,China Corresponding author: XU Jun-jie,E-mail: xujunjie@sina.com
Abstract:
Keywords:Bactericidal/permeability-increasing protein  DNA shuffling  Site-specific integration
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