人I型基质金属蛋白酶基因真核表达重组质粒的构建 |
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引用本文: | 彭慧,汪谦,等.人I型基质金属蛋白酶基因真核表达重组质粒的构建[J].中山医科大学学报,2001,22(6):433-435,453. |
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作者姓名: | 彭慧 汪谦 |
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作者单位: | 中山医科大学附属第一医院肝胆外科,广东广州510080 |
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摘 要: | 目的:构建人I型基质金属蛋白酶基因(MMP1)真核表达重组质粒,并进行序列分析。方法:用逆转录聚合酶链反应扩增人I型基质金属胶原酶cDNA,获得目的基因片段(1407bp)连接至pcDNA3载体,并转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆并鉴定,并对片断全长进行DNA序列测定。结果:所克隆人I型基质金属胶原酶cDNA,含全长MMP1编码区,与GeneBank公布序列比较,仅1318位的胞苷酸C突变为腺苷酸A。并成功构建了含有MMP1的真核表达质粒pcDNA3-MMPI。结论:以逆转录聚合酶链反应方法成功构建了人I型基质金属胶原酶cDNA克隆,并获得该基因真核表达质粒pcDNA3-MMP1,从而为下一步抗肝纤维化基因治疗研究提供物质基础。
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关 键 词: | 人I型基质金属胶原酶 DNA 克隆 质粒 基因寡核表达 肝纤维化 基因疗法 |
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