| 高糖培养脂多糖刺激下肺脏微血管内皮细胞通透性改变及DDAH/NOS/NO失平衡在其发生机制中的作用 |
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| 引用本文： | 刘秀娟,穆恩,梁英健,章志丹,马晓春. 高糖培养脂多糖刺激下肺脏微血管内皮细胞通透性改变及DDAH/NOS/NO失平衡在其发生机制中的作用[J]. 中国危重病急救医学, 2013, 25(3) |
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| 作者姓名： | 刘秀娟 穆恩 梁英健 章志丹 马晓春 |
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| 作者单位： | 1. 秦皇岛市第一医院重症医学科
2. 中国医科大学附属第一医院重症医学科,辽宁沈阳,110001 |
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| 基金项目： | 高等学校博士学科点专项科研基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 探讨高糖对脂多糖(LPS)刺激下血管内皮细胞损伤的影响及其机制.方法 将人肺脏微血管内皮细胞(PMVEC)分为正常糖组(NG组)、正常糖+LPS刺激组(NGL组)、高糖组(HG组)、高糖+LPS刺激组(HGL组),分别给予含10％小牛血清的正常糖(5.5 mmol/L)或高糖(33 mmol/L)培养5d,加入10 mg/L LPS刺激细胞24h.采用免疫荧光染色观察细胞纤维肌动蛋白(F-actin)的分布及变化；扫描电镜观察细胞膜窗孔数量及孔径变化；细胞迁移实验(Transwell)测定单层内皮细胞的辣根过氧化物酶(HRP)通透性；硝酸盐还原法(Griess法)检测细胞培养上清液中一氧化氮(NO)含量；蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)测定细胞二甲基精氨酸-二甲胺水解酶2(DDAH2)、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的蛋白表达.结果 与NGL组比较,HGL组PMVEC的F-actin分布排列紊乱,细胞膜窗孔异常增大、增多,细胞单层对HRP通透率增加[(53.62±6.70)％比(23.63±3.92)％,P＜0.01],细胞DDAH2表达(积分A值)减少(0.33±0.08比0.77±0.14,P＜0.01),iNOS表达(积分A值)增加(1.40±0.29比1.04±0.09,P＜0.01),eNOS表达(积分A值)减少(0.67±0.09比0.91±0.17,P＜0.05),上清液NO含量(μmol/L)增多(20.36±2.25比7.99±0.33,P＜0.01).结论 高糖加重LPS刺激下体外培养PMVEC的F-actin分布紊乱、单层细胞通透性增加；NO调节紊乱可能参与了PMVEC损害的发生.
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| 关 键 词： | 高糖 内毒素 二甲基精氨酸-二甲胺水解酶2 一氧化氮合酶 内皮细胞通透性 |
High glucose enhances permeability of human pulmonary microvascular endothelial cells by lipopolysaccharide stimulation in vitro and effect of DDAH/NOS/NO imbalance on its pathogenesis |
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| LIU Xiu-juan , MU En , LIANG Ying-jian , ZHANG Zhi-dan , MA Xiao-chun. High glucose enhances permeability of human pulmonary microvascular endothelial cells by lipopolysaccharide stimulation in vitro and effect of DDAH/NOS/NO imbalance on its pathogenesis[J]. Chinese critical care medicine, 2013, 25(3) |
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| Authors: | LIU Xiu-juan MU En LIANG Ying-jian ZHANG Zhi-dan MA Xiao-chun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | High glucose Endotoxin Dimethylarginine dimethylaminohydrolase 2 Nitricoxide synthase Endothelial cell permeability |
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