不同潮气量机械通气对大鼠肺小窝蛋白-1及其相关信号链酶表达的影响

目的 研究小窝蛋白-1(cav-1)及其相关信号链酶在不同潮气量(VT)机械通气大鼠肺组织中的表达变化.方法 按随机数字表法将SD大鼠分为5组,每组8只.对照组(A组)仅切开气管保留自主呼吸；保护性机械通气1h、2h组(B1组、B2组)VT为6 ml/kg;大VT通气1h、2h组(C1组、C2组)VT为30 ml/kg.A组在气管切开即刻,通气组分别于通气1h或2h末处死大鼠,光镜下观察肺组织病理学改变；逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测cav-1、eNOS的mRNA表达；免疫组化法检测肺组织中cav-1、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、白细胞介素-1受体相关激酶4(IRAK4)及核转录因子-κB(NF-κB)p65的蛋白表达；比色法测定髓过氧化物酶(MPO)活性；计算肺湿/干质量比值(W/D)；酶联免疫吸附试验(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.结果 A组、B1组、B2组之间肺组织cav-1、eNOS的mRNA表达,cav-1、eNOS、IRAK4、NF-κBp65的蛋白表达,肺W/D比值,MPO和TNF-α水平差异均无统计学意义.与相应B1、B2组比较,C1、C2组cav-1 mRNA(A值比值)和cav-1、IRAK4、NF-κBp65蛋白表达(A值)明显增加(cav-1 mRNA:0.833±0.085比0.384 ±0.011,1.162±0.166比0.388±0.014;cav-1蛋白:0.188±0.011比0.140±0.052,0.210±0.013比0.125±0.014;IRAK4蛋白:0.181 ±0.009比0.150±0.008,0.205±0.085比0.155 ±0.012;NF-κBp65蛋白:0.294±0.011比0.236±0.015,0.304±0.012比0.239±0.005),eNOS的mRNA(A值比值)和蛋白表达(A值)明显减少(eNOS mRNA:0.174±0.016比0.278=0.021,0.107±0.014比0.262±0.045；eNOS蛋白:0.180±0.017比0.211±0.010,0.161±0.016比0.216±0.013),肺W/D比值、MPO活性(U/g)和TNF-α含量(ng/L)明显升高(W/D:5.64±0.42比4.63±0.12,6.73±0.83比4.70±0.15;MPO:1.86±0.26比0.85±0.11,2.14±0.24比0.88±0.18; TNF-α:386.53±29.12比50.57±10.98,455.77±37.78比52.11±9.92),差异均有统计学意义(均P＜0.05).随通气时间延长,C2组各指标较C1组改变更为明显(均P＜0.05).结论 cav-1及其相关信号链酶在机械通气中的表达参与了呼吸机相关性肺损伤.

The effects of mechanical ventilation with different tidal volumes on the expression of caveolin-1 in lung tissue and its related downstream signaling in rats