| 体外定向诱导E14小鼠胚胎干细胞为肝细胞 |
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| 引用本文： | 孟瑛,黄绍良,闵军,郭中敏,吴燕峰,包蓉.体外定向诱导E14小鼠胚胎干细胞为肝细胞[J].中华肝脏病杂志,2004,12(12):714-717. |
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| 作者姓名： | 孟瑛 黄绍良 闵军 郭中敏 吴燕峰 包蓉 |
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| 作者单位： | 1. 510120,广州中山大学附属第二医院干细胞研究中心
2. 广州中山大学中山医学院实验动物中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30371503) |
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| 摘 要： | 目的探索体外定向诱导胚胎干细胞分化为肝细胞。方法常规方法培养E14小鼠胚胎干细胞(ESC)后，进行悬滴-悬浮培养，形成胚胎体，再进行分阶段定向诱导，在培养第9～12天、第12～18人以及第15～18天分别加入酸性成纤维细胞生长因子、肝细胞生长因子和制瘤素M。利用倒置相差显微镜观察细胞形态变化，逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法分析持异性基因mRNA的表达，并用吲哚氰绿(ICG)摄取和过碘酸雪夫反应(PAS)分析细胞的分化及功能。结果在诱导培养的第13天，细胞出现肝细胞样改变。RTPCR分析可见，在诱导的第6天和第12天分别可以榆测到内胚层或卵黄囊分化标志基因-甲状腺素运载蛋白和α1抗胰蛋白酶的mRNA表达，第6天出现末成熟肝细胞标志基因-甲胎蛋白mRNA表达，第9天、第15天和第18天分别开始出现成熟肝细胞的特异性标志基因-白蛋白、葡萄糖6磷酸酶、酪氨酸氨基转移酶mRNA表达。同时，ESC源性肝细胞表现为ICG摄取和PAS反应阳性，经过诱导，ICG阳性细胞数约占85．1％。结论ESC源性肝细胞具备肝细胞特性，FSC有可能成为肝细胞治疗的替代供体细胞。
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| 关 键 词： | 成熟肝细胞 mRNA表达 干细胞 ESC 体外定向诱导 基因 摄取 小鼠胚胎 悬浮培养 分化 |
| 修稿时间： | 2004年1月10日 |
E14 mouse embryonic stem cells differentiate into hepatocytESC |
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| MENG Ying,HUANG Shao-liang,MN Jun,GUO Zhong-min,WU Yan-feng,BAO Rong. "Center for Stem Cell Research,the Second Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University,Guangzhou ,China.E14 mouse embryonic stem cells differentiate into hepatocytESC[J].Chinese Journal of Hepatology,2004,12(12):714-717. |
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| Authors: | MENG Ying HUANG Shao-liang MN Jun GUO Zhong-min WU Yan-feng BAO Rong "Center for Stem Cell Research the Second Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University Guangzhou China |
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| Institution: | Center for Stem Cell Research, the Second Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Guangzhou 510120, China. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Embryo Stem cells Hepatocyte Differentiation |
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