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兔骨髓源性神经干细胞分化为成熟神经元样细胞的特征研究
引用本文:陈剑荣,徐如祥,姜晓丹,徐强,邹雨汐,蔡颖谦,丁涟沭. 兔骨髓源性神经干细胞分化为成熟神经元样细胞的特征研究[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2004, 8(16): 3042-3043
作者姓名:陈剑荣  徐如祥  姜晓丹  徐强  邹雨汐  蔡颖谦  丁涟沭
作者单位:解放军第一军医大学珠江医院全军神经医学研究所,广东省广州市,510280
基金项目:国家自然科学基金(30270491),全军医学科研“十五计划重大课题(01Z054),广东省自然科学基金项目粤科基办(2000)25犦,广东省科技计划项目犤粤财企2001(367)~~
摘    要:目的:探讨兔骨髓源性神经干细胞(bonemarrowstromalcells,BMSCs)经体外培养及诱导分化成的神经元样细胞,能否合成分泌5-羟色胺神经生物活性物质成分。方法:分离兔BMSCs,应用神经干细胞培养液和分化诱导因子进行体外培养和诱导分化,免疫细胞化学鉴定;并应用高效液相色谱法(HPLC)检测其5-羟色胺生物活性物质的含量。细胞培养所涉及的细胞因子主要有脑源性神经营养因子(BDNF)和维A酸。结果:BMSCs培养12d可见大而圆细胞,免疫细胞化学鉴定Nestin抗原阳性;培养20d可见长突起神经元样细胞,神经核蛋白(NeuN)免疫细胞化学检查阳性,高效液相检测BMSCs、空白神经干细胞培养液及L-02肝细胞阴性对照组未测到5-羟色胺生物活性物质,经体外培养增殖14d的神经干细胞及培养液、体外诱导分化20d的神经元样细胞及培养液则可检测到5-羟色胺分别为:每1×107细胞中(1.7940±0.0095),(4.010±0.1170)μg/L,差异有非常显著性意义(t=30.6323,P=0.001)。方差分析显示:随着骨髓基质细胞培养天数的增加,其所含的5-羟色胺浓度也渐增加,组间5-羟色胺含量差异有显著意义(P<0.01)。结论:兔BMSCs能在体外增殖,并表达Nestin抗原;而且,在适宜条件下能分化成神经元样细胞,并表达成熟神经元特异性核蛋白,合成、分泌5-羟色胺神经递质。

关 键 词:神经系统/细胞学  干细胞  5-羟色胺  骨髓细胞  色谱法  高压液相
文章编号:1671-5926(2004)16-3042-02
修稿时间:2004-02-29

Characteristic study on the differentiation of rabbit bone marrow stromal cells into neuron-like cells
Abstract:
Keywords:
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