同种异体脱钙骨与骨髓间充质干细胞关节腔内共培养:与同腔软骨性状的对比简

背景：临床发现膝关节内游离体能长期存在于关节腔内并能保持一定的软骨组织学特性和生理学特性，因此大胆提出假设：关节腔环境可能是软骨细胞生长、发育的较佳环境并提出“腔内培养，腔内移植”的理念。目的：观察兔骨髓间充质干细胞复合同种异体脱钙骨基质体外培养或关节腔内培养组织工程软骨与同腔软骨的性状差异。 方法：实验分3组进行，体外培养组将经成软骨诱导的乳兔骨髓间充质干细胞与成年兔脱钙骨基质体外复合培养；腔内培养组将经成软骨诱导的乳兔骨髓间充质干细胞与成年兔脱钙骨基质以筋膜包裹，复合培养于成年新西兰兔膝关节腔内，以同腔内正常软骨为对照。 结果与结论：培养12周后：①体外培养组苏木精-伊红染色见软骨细胞少量增生，胞核蓝染；甲苯胺蓝染色见软骨细胞排列无序，少量周围基质包绕；Masson染色阳性区域小，细胞排列无序；Ⅱ型胶原免疫组织化学见软骨细胞胞浆及胞外基质少量黄色颗粒。②腔内培养组苏木精-伊红染色见软骨细胞增生，胞核蓝染；甲苯胺蓝染色见软骨细胞成串排列，软骨陷窝形成，周围基质包绕；Masson染色阳性，软骨细胞多，基质蓝染，按一定应力方向排列；Ⅱ型胶原免疫组织化学见细胞外基质中出现较多棕黄色颗粒，Ⅱ型胶原染色阳性。说明骨髓间充质干细胞与同种异体脱钙骨基质复合物可在体外及膝关节腔内培养出组织工程软骨，关节腔内培养的软骨比体外培养的软骨更接近正常软骨。