| 摘 要： | 目的研究U251胶质瘤细胞Wip1基因沉默对DNA核苷酸切除修复酶XPA、XPC的影响。方法体外培养人胶质瘤细胞U251,Wip1(-)组采用携带Wip1基因RNA干扰载体的慢病毒沉默Wip1基因,经实时定量PCR验证。对照组(NC组)采用阴性对照病毒感染。使用替莫唑胺(temozolomide,TMZ)进行干预,将细胞分为NC组、NC+TMZ组、Wip1(-)组和Wip1(-)+TMZ组。CCK-8法检测各组细胞的增殖,实时定量PCR检测细胞XPA、XPC m RNA表达,免疫印迹检测细胞XPA、XPC蛋白表达。结果 TMZ干预后48 h、72 h、96 h、120 h、144 h,Wip1(-)+TMZ组细胞增殖率低于其他3组(P0.05)。TMZ干预48 h后,NC+TMZ组细胞XPA和XPC m RNA表达远远高于NC组(P0.05),同时XPA和XPC蛋白表达远远高于NC组(P0.05)。TMZ干预48 h后,Wip1(-)+TMZ组细胞XPC m RNA和XPA蛋白表达水平明显高于Wip1(-)组(P0.05)。结论 Wip1基因与U251脑胶质瘤细胞DNA损伤修复有关,可通过调节下游产物XPA与XPC参与细胞核苷酸切除修复过程。
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