金黄色葡萄球菌coa基因实时荧光PCR的建立及应用研究

目的建立金黄色葡萄球菌coa基因Taq Man-MGB探针实时荧光PCR,并在食品安全风险监测中应用。方法根据金黄色葡萄球菌coa基因序列设计引物与Taq Man-MGB探针,建立并优化实时荧光PCR反应体系,并在食品安全风险监测中应用,同步进行传统细菌分离,比较2种检测方法的符合性。结果建立金黄色葡萄球菌coa基因Taq Man-MGB探针实时荧光PCR仅需42 min可完成检测,与表皮葡萄球菌、链球菌等非目标细菌无交叉反应,对重组质粒的灵敏度达5 copy/μl;对200份食品安全风险监测标本进行快速筛查,检测出15份阳性,传统方法也从相应样本中分离出15株金黄色葡萄球菌。结论针对金黄色葡萄球菌coa基因建立的Taq Man-MGB探针实时荧光PCR,可提高食品检测速度和灵敏度。