TPCK胰酶和普通胰酶对各亚型流感病毒在MDCK细胞分离培养中的影响

目的比较不同种类的胰酶对不同亚型流感病毒在MDCK细胞增殖能力的影响,寻找最佳胰酶类型和浓度。方法将血凝滴度为1∶16的甲型H1N1、H3N2、Victoria、Yamagata流感病毒稀释100倍接种到MDCK细胞上,分别改变维持液中TPCK-胰酶和普通胰酶浓度,在24 h、48 h、72 h、96 h取培养物上清测血凝滴度,比较不同亚型流感病毒在MDCK细胞病变速度和病毒含量的差异。结果 TPCK胰酶对各亚型流感病毒在MDCK细胞培养中的增值能力明显提高,TPCK胰酶在甲型H1N1、H3N2、Victoria、Yamagata流感病毒的最优浓度分别为1μg/ml~3μg/ml、1μg/ml、0.5μg/ml~2μg/ml、1μg/ml。普通胰酶对甲型H1N1流感病毒的增值能力有提高作用,最佳胰酶浓度为5μg/ml,普通胰酶对H3N2、Victoria、Yamagata流感病毒在MDCK细胞的增值无提高作用。结论 MDCK培养流感病毒时,需要添加TPCK胰酶。