摘 要: | 目的评估妊娠大鼠来源脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)在急性肝损伤中的修复作用。方法取18周龄妊娠SD大鼠分离培养ADSCs并鉴定。另取SD大鼠20只随机分为A、B、C、D 4组(n=5),A组大鼠不作处理,作为正常对照;B~D组大鼠腹腔注射CCl4制备急性肝损伤模型。造模后2 h,A组于大鼠脾脏注射DPBS,B组不注射任何试剂,C、D组分别于大鼠脾脏注射0.1 mL正常大鼠来源和妊娠大鼠来源ADSCs(2×10~6个/mL)。注射后7 d处死动物,取眼球血检测血清中总胆红素(total bilirubin,TBIL)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartic acid transaminase,AST)、白蛋白(albumin,ALB)和肝功能总蛋白(total protein,TP)含量;取肝组织切片行HE染色检测损伤肝组织形态学变化;免疫组织化学染色检测肝组织中Ki67、甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)和ALB的表达情况。结果 B组血清中TBIL、ALT、AST含量显著高于A、C、D组,ALB、TP含量显著低于A、C、D组,差异均有统计学意义(P0.05)。C、D组血清中TBIL、ALT、AST含量显著高于A组,C组高于D组,差异均有统计学意义(P0.05);A、C、D组血清中ALB含量差异无统计学意义(P0.05);C、D组血清中TP含量显著低于A组(P0.05),C、D组间比较差异无统计学意义(P0.05)。HE染色示:A组大鼠肝组织结构清晰,细胞排列整齐,大小均匀;B组大鼠肝细胞明显出现水肿,细胞排列紊乱,可见肝小叶内点状坏死,组织出现弥漫性炎性细胞浸润;C、D组大鼠肝组织炎症和肝细胞坏死程度较B组明显减轻,同时由线粒体和粗面内质网扩张造成的空泡数量降低,其中D组肝损伤改善程度较C组更显著。免疫组织化学染色示:C、D组Ki67阳性细胞率显著高于A、B组,B组高于A组,D组高于C组,差异均有统计学意义(P0.05)。A、B组AFP均无表达,而C、D组阳性表达,D组AFP阳性细胞率显著高于C组(t=3.006,P=0.017)。C、D组ALB表达均显著高于A、B组,D组高于C组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论与正常大鼠来源ADSCs移植比较,妊娠大鼠来源ADSCs移植后,肝损伤大鼠肝功能改善程度更显著。
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