| CHIR99021和Wnt3a在小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化中的作用 |
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| 引用本文： | 邹传德,杨谋广,王爱玲.CHIR99021和Wnt3a在小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化中的作用[J].安徽医科大学学报,2017,52(1). |
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| 作者姓名： | 邹传德 杨谋广 王爱玲 |
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| 作者单位： | 安徽医科大学第一附属医院心血管内科,合肥,230022;安徽医科大学第一附属医院心血管内科,合肥,230022;安徽医科大学第一附属医院心血管内科,合肥,230022 |
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| 基金项目： | 安徽高校自然科学研究项目 |
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| 摘 要： | 目的 观察Wnt/β-catenin信号通路激活剂CHIR99021和Wnt3a在小鼠胚胎干细胞(mESCs)向心肌细胞分化中的作用.方法 采用悬浮一步培养法形成拟胚体(EBs),在EBs形成后第2天至第5天分别加入CHIR99021、Wnt3a,命名为CHIR99021组及Wnt3a组,将自动分化的EBs作为对照组.用免疫荧光法检测心肌特异性蛋白肌球蛋白重链(α-MHC)、肌钙蛋白T(cTNT)及膜联蛋白43(CX43)的表达.用qRT-PCR检测中胚层标志基因Brachyury、心肌前体细胞标志基因Nkx2.5、心肌细胞特异性标志基因α-MHC、cTnT和Cx43 mRNA的表达.用Western blot法检测 α-MHC、cTNT和CX43蛋白表达.结果 免疫荧光法提示各组mESCs能够向心肌细胞分化.在CHIR99021和Wnt3a诱导分化过程中,Brachyury在分化第7天达高峰;Nkx2.5、α-MHC、cTnT和Cx43的mRNA表达量随着分化时间的延长而逐渐增加,第15天增加最为明显,且CHIR99021组和Wnt3a组高于对照组;CHIR99021组优于Wnt3a组(P<0.05,P<0.01).Western blot检测结果显示CHIR99021组和Wnt3a组α-MHC、cTNT和CX43蛋白表达量明显高于对照组,CHIR99021组高于Wnt3a组.结论 CHIR99021和Wnt3a在分化早期阶段通过活化Wnt/β-catenin信号通路可促进mESCs心肌细胞分化,且CHIR99021促心肌分化作用优于Wnt3a.
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| 关 键 词： | CHIR99021 Wnt3a 小鼠胚胎干细胞 心肌细胞 |
Effects of CHIR99021 and Wnt3 a on cardiac differentiation of mouse embryonic stem cells |
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| Zou Chuande,Yang Mouguang,Wang Ailing.Effects of CHIR99021 and Wnt3 a on cardiac differentiation of mouse embryonic stem cells[J].Acta Universitis Medicinalis Anhui,2017,52(1). |
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| Authors: | Zou Chuande Yang Mouguang Wang Ailing |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CHIR99021 Wnt3 a mouse embryonic stem cells cardiomyocytes |
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