核因子κB在人卵巢癌血管生成中的作用及机制

背景和目的:有研究表明核因子κB(nuclear factor κB,NFκB)与体外血管生成有关,但其与卵巢癌血管生成的关系未见报道.本研究旨在探讨NFκB在鸡胚尿囊膜(chick chorioallantcic membrane,CAM)上人卵巢癌(human ovarian carcinoma,HOC)血管生成中的作用及作用机制.方法:将指数生长期的HOC细胞株TYK细胞以1×109/只鸡胚接种于CAM以建立HOC CAM模型.1、20只鸡胚应用ELISA法检测接种细胞后0 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h时间点NFκB、bFGF、αV β3的水平;2、检测NF κB、bFGF和αVβ3在CAM上人卵巢癌血管生成过程中的水平及其对血管生成的影响.另将80只鸡胚分为6组,细胞接种后6 h,不同组CAM上分别加入生理盐水(normal saline,NS)(对照组,16只)、抗NF κB(A组,16只)、抗bFGF(B组,16只)、抗NFκB+抗bFGF(D组,8只)、接种后12 h加入抗αV β3(C组,16只)和抗NF κB+抗αVβ3(E组,8只)抗体.加抗体后48h NS、A、B、C组各取出8只鸡胚,用ELISA检测CAM中NFκB、bFGF和αV β3的水平.其余的鸡胚孵育5天,用图像分析法检测各组CAM血管面积比(vessel area/area,VA/A).结果:人卵巢癌CAM模型上NF κB、bFGF水平自6h、αV β3水平自接种后12 h开始显著增加(P＜0.01)(0.185±0.01、0.771±0.16、0.231±0.02),三者水平均在48h达到高峰(P＜0.01)(0.337±0.01、1.639±0.01、0.349±0.01).在各个时间点bFGF的水平均显著高于NF κB及αV β3(P＜0.01),NF κB及αV β3的水平差异无显著性(P＞0.05).A、B组NF κB、αV β3与bFGF水平显著低于NS组(P＜0.01),(0.098±0.02、0.156±0.02、0.329±0.01;1.106±0.33、0.412±0.01、1.591±0.13;0.138±0.03、0.114±0.02、0.322±0.01).C组αVβ3水平与NS组相比显著降低(P＜0.01),(0.119±0.02、0.322±0.01),而NFκB、bFGF表达与NS组相比无显著变化(P＞0.05).A、B、C、D、E五组VA/A均显著低于NS组(P＜0.05)(26.10±13.71、34.12±4.85、25.50士11.41、14.32±3.11、24.36±4.95、66.62±17.64),D组VA/A与A组相比则显著降低(P＜0.05)(14.32±3.11、26.10±13.71),而A、B、C、E四组间差异无显著性(P＞0.05).结论:NFκB通过上调bFGF与αV β3的表达与bFGF共同促进卵巢肿瘤血管的生成;它不仅可作为血管生成的标记物,还可成为卵巢癌的治疗靶.

Role and Mechanism of Nuclear Factor κB in Angiogenesis of Human Ovarian Carcinoma