LC-MS/MS测定人血浆中依折麦布和总依折麦布的含量及其应用

目的 建立人血浆中依折麦布(EZE)和总依折麦布(EZE-T)的LC-MS/MS测定方法，并用于依折麦布片人体生物等效性(bioequivalence，BE)研究。方法 分别采用直接沉淀法和酶解后沉淀法处理血浆样品。内标为依折麦布-d4(EZE-d4)。色谱柱为Waters ACQUITY UPLC?BEH C18(2.1*50mm，1.7μm)，流动相为0.1%乙酸-乙腈(A)，0.1%乙酸-水(B)，梯度洗脱，流速0.2 mL.min-1。在ESI源负离子模式下使用离子对m/z 408.2→271.0(EZE)和m/z 412.2→271.1(EZE-d4)进行MRM定量分析。对健康受试者口服相同剂量的受试制剂或参比制剂依折麦布片后的血药浓度进行定量分析。结果 血浆中内源性物质不干扰待测物定量，EZE、EZE-T及EZE-d4不存在相互干扰和/或相互转化。人血浆中EZE和EZE-T的定量范围分别为0.1～20，1～200 ng.mL-1，线性关系良好。待测物与内标提取回收率均在102.4%~109.8％之间；内标归一化基质效应因子均在98.5%~99.4%，CV均<5%；批内、批间准确度偏差均<15%，CV均<10%。用本法测定得到的EZE和EZE-T的浓度水平及获取的药代参数与文献报道一致，ISR复测值与原测值的偏差均<10%。结论 本法特异性强、灵敏、准确，重复性好，所需样本体积少，满足依折麦布片人体BE研究的定量分析需求。

Determination of Ezetimibe and Total Ezetimibe in Human Plasma by LC-MS/MS and Its Application