| 原代大鼠肝细胞分离方法与冻存条件的优化 |
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| 引用本文： | 姚云清,张定凤,倪小毅,卢萍,王波,周卫平,黄爱龙,任红. 原代大鼠肝细胞分离方法与冻存条件的优化[J]. 重庆医科大学学报, 2003, 28(3): 303-306 |
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| 作者姓名： | 姚云清 张定凤 倪小毅 卢萍 王波 周卫平 黄爱龙 任红 |
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| 作者单位： | 1. 重庆医科大学临床学院感染科,重庆,400016
2. 重庆医科大学病毒性肝炎研究所,重庆,400010 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 ( 3 9670 3 40 )，重庆市科委基金( 2 0 0 2 1889) |
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| 摘 要： | 目的 :优化原代大鼠肝细胞 (PRH)分离方法与冻存条件。方法 :建立低浓度胶原酶原位循环灌流法分离肝细胞 ;分别采用含 2 %与l0 %DMSO的冻存液于 - 70℃或液氮中冻存PRH ,并比较各组冻存后PRH活力。结果 :1.该分离方法肝细胞产量为 1.5 84± 0 .5 2 5× 10 8/10 0g大鼠体重 ,存活率达 95 .2± 2 .9% ,肝细胞纯度 >95 % ,胶原酶用量减少为 4 .5mg/10 0 g大鼠体重。 2 .含 2 %DMSO冻存液于 - 70℃组与液氮组PRH存活率均可达 90 %～ 95 % ;ALB冻存 14d - 70℃组PRH明显高于液氮组与新鲜分离组 ,LDH值于冻存 7d的 - 70℃组与液氮组明显低于新鲜分离组 ,其它各组间均无显著差异。结论 :低浓度胶原酶原位循环灌流法为高效的PRH分离技术 ;含 2 %DMSO冻存液于 - 70℃可作为原代肝细胞冻存的理想条件。
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| 关 键 词： | 原代肝细胞 分离技术 冻存条件 优化 |
| 文章编号： | 0253-3626(2003)03-0303-04 |
| 修稿时间： | 2002-09-04 |
Optimization of the techniques for isolation and cryopreservation of primary rat hepatocytes |
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| YAO Yunqing,et al. Optimization of the techniques for isolation and cryopreservation of primary rat hepatocytes[J]. Journal of Chongqing Medical University, 2003, 28(3): 303-306 |
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| Authors: | YAO Yunqing et al |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hepatocyte Technique/Isolation/Cryopreservation Optimization |
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