下调PALM3表达抑制脂多糖诱导的巨噬细胞炎性反应

目的 探讨抑制paralemmin-3（PALM3）表达对脂多糖（LPS）诱导的大鼠肺泡巨噬细胞系（NR8383）炎性反应的影响。方法 将NR8383细胞并接种至6孔板中，待融合度达70%，加入0.5μg/ml LPS刺激12h，用免疫荧光检测细胞PALM3表达及亚定位；用0.5μg/ml LPS刺激NR8383细胞并在0、3、6、12、24和48h收集细胞提取总RNA，用RT-PCR法检测PALM3 mRNA；同前接种细胞至24孔板，待融合度达70%，将PALM3小干扰核糖核苷酸（siRNA）转染NR8383细胞（PALM3 siRNA转染组），同时设立正常NR8383细胞组和对照转染组（转染control siRNA），转染48h后，提细胞总蛋白用Western blot法检测PALM3蛋白水平；3组细胞给予LPS刺激12h，收集培养上清和核蛋白，用ELISA法检测培养上清中IL-8、IL-6的水平及核转录因子（NF-κB）转录活性。结果 PALM3分子在NR8383细胞中有表达，LPS可诱导PALM3表达；PALM3 siRNA转染后成功下调PALM3蛋白表达，予LPS刺激后，与正常细胞及对照转染组比较，PALM3 siRNA转染组培养上清中白介素-8（IL-8）和IL-6含量减少，PALM3 siRNA转染组细胞中NF-κB转录活性亦被抑制。结论 NR8383细胞中有PALM3表达，LPS可诱导NR8383细胞中PALM3的蛋白表达，下调PALM3表达可抑制LPS诱导的炎性反应。

Downregulation of Paralemmin-3 Expression Inhibits the Inflammatory Reaction Induced by LPS in Alveolar Macrophages