NLRP3/caspase-1/IL-1β信号通路在 HK-2细胞高糖缺氧复氧损伤中的作用 |
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引用本文: | 肖业达,黄亚医,黄婷,汪华新,赵博,王雅枫.NLRP3/caspase-1/IL-1β信号通路在 HK-2细胞高糖缺氧复氧损伤中的作用[J].医学研究杂志,2019,48(3):49-53. |
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作者姓名: | 肖业达 黄亚医 黄婷 汪华新 赵博 王雅枫 |
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作者单位: | 武汉大学人民医院麻醉科 430060,武汉大学人民医院麻醉科 430060,武汉大学人民医院麻醉科 430060,武汉大学人民医院麻醉科 430060,武汉大学人民医院麻醉科 430060,武汉大学人民医院麻醉科 430060 |
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基金项目: | 湖北省自然科学基金资助项目(2016CFB167);中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(2042017kf0147) |
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摘 要: | 目的 探讨Nod样受体蛋3炎性体(nod-like receptor protein-3, NLRP3)/半胱天冬酶-1(caspase-1)/白介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)信号通路介导的高糖缺氧复氧诱导人肾小管上皮细胞(human renal proximal tubular cells,HK-2)的损伤。方法 采用数字表法将人肾小管上皮细胞(HK-2)随机分为5组(n=5),即低糖组(NG组)、低糖缺氧复氧组(NHR组)、高糖组(HG组)、高糖缺氧复氧组(HHR组)和高糖缺氧复氧+NLRP3抑制剂BAY11-7082(5μmol/L)组(HHR-BAY组)。采用高糖(30mmol/L)刺激72h建立高糖模型,缺氧4h复氧2h建立缺氧复氧模型。CCK-8检测细胞存活率;酶标仪测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性;荧光探针DCFH-DA法检测细胞内活性氧自由基(reactive oxygen species, ROS)含量;ELISA法检测IL-1β含量和caspase-1活性;免疫印迹法和免疫荧光法检测细胞NLRP3蛋白的表达。结果 与NG组比较,NHR组与HG组ROS和IL-1β含量,caspase-1活性,NLRP3表达升高,细胞存活率,SOD活性降低(P均<0.05);分别与HG组和NHR组比较,HHR组ROS和IL-1β含量,caspase-1活性,NLRP3表达升高,细胞存活率,SOD活性降低(P均<0.05);而NLRP3抑制剂BAY11-7082预处理可显著抑制细胞损伤和氧化应激水平,下调NLRP3蛋白水平,caspase-1活性和IL-1β含量(P均<0.05)。结论 NLRP3/caspase-1/IL-1β信号通路参与了高糖缺氧复氧诱导的HK-2细胞损伤过程。
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关 键 词: | NLRP3/caspase-1/IL-1β信号通路 高糖 缺氧复氧 人肾小管上皮细胞 |
收稿时间: | 2018/3/16 0:00:00 |
修稿时间: | 2018/3/21 0:00:00 |
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