ANKRD13A在肝癌组织中的表达及对其生物学行为的影响

目的 检测锚蛋白重复结构域13A蛋白(ankyrin repeat domain protein 13A)在肝癌患者肝组织中的表达情况,并探究其对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响及可能的分子机制。方法 利用免疫组织化学、Western blot法以及实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测肝癌患者癌组织和癌旁组织中ANKRD13A的表达水平,并分析其表达水平与患者临床病理参数的相关性；在肝癌细胞系SMMC-7721中,转染目标质粒或空载质粒,通过嘌呤霉素筛选,建立稳定过表达ANKRD13A或空载质粒的细胞系。在体外,分别利用细胞迁移实验、划痕愈合实验以及CCK-8细胞增殖实验,检测过表达ANKRD13A对细胞迁移和增殖能力的影响；在体内,通过裸鼠皮下成瘤实验,进一步验证ANKRD13A对肝癌细胞增殖能力的影响；最后通过信号通路分析,探究ANKRD13A调控肝癌细胞生物学行为可能的分子机制。结果 ANKRD13A在肝癌组织中的表达显著低于对应的癌旁组织,并且其表达水平与患者的BCLC分期(P=0.001)和是否合并肝硬化(P=0.003)显著相关。体外细胞模型和体内裸鼠实验结果表明,过表达ANKRD13A可显著抑制肝癌细胞的迁移和增殖能力,减少肝癌细胞中MEK1/2的磷酸化水平。结论 ANKRD13A可能通过调控MEK1/2的磷酸化水平进而影响肝癌细胞的增殖和迁移能力,有望成为肝癌治疗的潜在靶点。