mTOR高选择性抑制剂AZD8055对乳腺癌多西紫杉醇耐药细胞株化疗敏感度的作用

目的 探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）高选择性抑制剂AZD8055对乳腺癌多西紫杉醇耐药细胞株化疗敏感度的作用。方法 体外培养MCF-7细胞株、MCF-7/Doc细胞株。噻唑蓝比色法检测AZD8055作用后MCF-7/Doc细胞对多西紫杉醇的半数抑制浓度（IC₅₀），实验分2组：MCF-7/Doc组和MCF-7/Doc+AZD8055组。实时荧光定量PCR和蛋白印迹法检测AZD8055作用后，细胞MDR1基因和P-gp蛋白的表达，实验分4组：MCF-7组、MCF-7+AZD8055组、MCF-7/Doc组、MCF-7/Doc+AZD8055组。裸鼠体内荷瘤实验检测AZD8055的体内抑瘤率，实验分3组：空白对照组、阴性对照组和AZD8055组。为排除MCF-7和MCF-7/Doc细胞特异性对实验结果的影响，研究采用乳腺癌MDA-MB-231和MDA-MB-231/Doc细胞株重复了上述实验。结果 噻唑蓝比色法检测显示，MCF-7/Doc+AZD8055组细胞对多西紫杉醇的IC₅₀为5.1±0.6μmol/L，明显低于MCF-7/Doc组（P<0.05），AZD8055对多西紫杉醇的耐药逆转倍速为5.4。实时荧光定量PCR检测显示，MCF-7/Doc组细胞MDR1基因表达量为1.84±0.35，明显高于MCF-7组（P<0.05）；而MCF-7/Doc+AZD8055组细胞MDR1基因表达量为1.21±0.29，明显低于MCF-7/Doc组（P<0.05）。蛋白印迹法检测显示，MCF-7/Doc组细胞P-gp蛋白表达量分别为0.93±0.15，明显高于MCF-7组（P<0.05）；而MCF-7/Doc+AZD8055组细胞P-gp蛋白表达量0.54±0.10，明显低于MCF-7/Doc组（P<0.05）。AZD8055组肿瘤生长速度明显低于空白对照组和阴性对照组（P<0.05），AZD8055对移植瘤具有显著的抑制作用，抑瘤率为48.95%，差异有统计学意义（P<0.05）。MDA-MB-231和MDA-MB-231/Doc细胞株重复实验得到了相似结果。结论 mTOR高选择性抑制剂AZD8055可显著提高乳腺癌细胞株对多西紫杉醇的化疗敏感度，其作用机制可能与抑制MDR1和P-gp表达有关。

Effects of mTOR Highly Selective Inhibitor of AZD8055 on Docetaxel-Resistant Breast Cancer Cell Lines