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血清血浆对成骨细胞增殖和分化的影响
引用本文:贺自克,王上增,薛艳,郑昱新,丁道芳. 血清血浆对成骨细胞增殖和分化的影响[J]. 医学研究杂志, 2018, 47(11): 51-56
作者姓名:贺自克  王上增  薛艳  郑昱新  丁道芳
作者单位:450002 郑州, 河南省中医院,450002 郑州, 河南省中医院,201203 上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心;201203 上海市中医药研究院骨伤科研究所,201203 上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心;201203 上海市中医药研究院骨伤科研究所,201203 上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心;201203 上海市中医药研究院骨伤科研究所
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81073114,81072830)
摘    要:目的 观察大鼠血清和血浆对大鼠成骨细胞的增殖和分化的影响。方法 取出生24h SD大鼠头颅骨,Ⅰ型胶原酶多次消化后获得成骨细胞,DMEM加10%FBS进行常规培养,同时细胞免疫荧光鉴定Col1a1的表达,传代后分别用10%血清(rat serum,RS)和10%血浆(rat plasma,RP)进行培养,分别命名为血清组和血浆组。培养24h,镜下观察细胞形态变化及检测增殖蛋白PCNA的表达;CCK8方法检测成骨细胞增殖。成骨诱导刺激1周后,检测(alkaline phosphatase,ALP)染色、ALP活性,同时定量PCR检测ALP、Runx2、Col1a1和OCN基因的表达。分化3周后,进行矿化结节染色。成骨细胞经过血清和血浆处理6h后,标记钙离子探针检测钙离子内流。结果 几乎所有的细胞均表达Ⅰ型胶原。血清组成骨细胞明显变得细长,失去成骨细胞原有的特征;大鼠血浆组的PCNA表达水平低于大鼠血清组,CCK8检测表明血清组细胞增殖速度高于血浆组细胞;大鼠血浆组碱性磷酸酶活性及染色显著强于大鼠血清组;成骨性基因ALP、Runx2、OCN和Col1a1在大鼠血浆刺激下,表达明显高于血清组。大鼠血浆组的钙离子内流和矿化结节明显优于大鼠血清组。结论 大鼠血清刺激大鼠成骨细胞的增殖,在促进成骨分化方面的作用弱于大鼠血浆的作用。

关 键 词:原代成骨细胞  成骨性基因  细胞增殖  大鼠血清和大鼠血浆  成骨分化
收稿时间:2018-01-04
修稿时间:2018-01-26

Effects of Rat RP and RS on Cell Proliferation and Osteoblastic Differentiation of Rat Osteoblasts
He Zike,Wang Shangzeng,Xue Yan. Effects of Rat RP and RS on Cell Proliferation and Osteoblastic Differentiation of Rat Osteoblasts[J]. Journal of Medical Research, 2018, 47(11): 51-56
Authors:He Zike  Wang Shangzeng  Xue Yan
Affiliation:Henan Province Hospital of TCM, Henan 450002, China,Henan Province Hospital of TCM, Henan 450002, China
Abstract:
Keywords:Primary osteoblasts  Osteogenic gene  Cell proliferation  Rat serum and rat plasma  Osteogenic differentiation
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