| FasL启动子调控的报告基因表达质粒的构建及活性分析 |
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| 引用本文： | 柴蔚然,高惠宝. FasL启动子调控的报告基因表达质粒的构建及活性分析[J]. 中国男科学杂志, 2006, 20(4): 4-6,10 |
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| 作者姓名： | 柴蔚然 高惠宝 |
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| 作者单位： | 上海交通大学医学院生物化学与分子生物学教研室,上海,200025 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30570681) |
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| 摘 要： | 目的扩增FasL启动子并构建带有FasL启动子的荧光素酶报告质粒,并评价在皮质酮(啮齿类动物体内的糖皮质激素)作用的睾丸Leydig细胞中,由FasL启动子调控的荧光素酶的表达活性。本研究将为进一步分析Leydig细胞中FasL启动子转录调控的作用机制奠定基础。方法采用DNA重组技术构建由FasL启动子调控的荧光素酶报告基因的表达质粒。此重组质粒经阳离子脂质体LipofectAMINE介导,瞬时转染入Leydig细胞中,36h后细胞经皮质酮处理,并于48h时收集细胞。测定荧光素酶的相对表达活性。结果(1)酶切及测序证实成功扩增FasL基因启动子并构建了带有FasL基因启动子的报告基因表达质粒；(2)皮质酮处理的Leydig细胞中FasL启动子调控的荧光素酶表达质粒的表达活性显著增高。结论构建成功的带有FasL启动子的荧光素酶报告质粒可准确地评价FasL启动子在凋亡过程中的作用。
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| 关 键 词： | FasL启动子 报告基因 表达载体 Leydig细胞 皮质酮 |
| 收稿时间： | 2006-02-15 |
| 修稿时间： | 2006-02-15 |
Construction and analysis of activation of recombinant firefly luciferase reporter plasmid pGL3-FLP-Luc |
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| Chai Weiran,Gao Huibao. Construction and analysis of activation of recombinant firefly luciferase reporter plasmid pGL3-FLP-Luc[J]. Chinese Journal of Andrology, 2006, 20(4): 4-6,10 |
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| Authors: | Chai Weiran Gao Huibao |
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| Affiliation: | Department of Biochemistry and Molecular Biology, Faculty of Basic Medicine, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200025,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | FasL promoter reporter gene expression vector Leydig cells corticosterone |
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