| 摘 要： | 目的研究h TERT基因对移植的内皮祖细胞(EPC)在体内的增殖和血管新生影响的机制。方法将90只健康雄性Sprague-Dawley大鼠(200～300 g)随机分为3组:对照组(n=30)、EPC转染组(n=30)和h TERT-EPC转染组(n=30)。选择三个梗死病灶区域通过心肌内注射移植EPC和h TERT-EPCs,对照组的大鼠注射磷酸缓冲盐溶液;通过苏木精-曙红染色的心肌的石蜡切片,观察心肌梗死区域的毛细血管再生;通过RT-qPCR和蛋白质免疫印迹检测血管内皮细胞标记物(CD31、CD34、CD105和CD146) mRNA和蛋白的表达量;通过检测对照组和模型组小鼠体外骨髓EPCs的增殖评估h TERT对EPC功能的影响;使用酶标仪检测NO浓度和乳酸脱氢酶(LDH)浓度,通过商业测定试剂盒检测诱导型一氧化氮合酶(i NOS)活性水平;通过酶联免疫吸附试验试剂盒检测血管内皮生长因子、血管内皮生长因子受体和丝裂原活化蛋白激酶含量。结果与EPC转染组相比,h TERT-EPC转染组毛细血管在心肌梗死区增生较多;与EPC转染组相比,h TERT-EPC转染组CD31、CD34、CD105、CD146 mRNA和蛋白表达水平增加,差异有统计学意义(P0. 05);与对照组(173. 52±20. 17) EPC相比,模型组(32. 14±12. 33)小鼠的EPC显示受损的增殖,h TERTEPC转染组(122. 14±13. 44)增加了受损EPC的增殖,差异有统计学意义(P0. 05); h TERT-EPC转染组中NO(18. 23±3. 15)、LDH(4. 03±0. 44)和i NOS(4. 52±1. 13)的分泌均高于EPC转染组[(14. 62±2. 18)、(3. 24±0. 67)、(3. 83±0. 82)],差异有统计学意义(P0. 05); h TERT-EPC转染组血管内皮生长因子、血管内皮生长因子受体和丝裂原活化蛋白激酶与EPC转染组相比升高,差异有统计学意义(P0. 05)。结论 h TERT基因促进移植的内皮祖细胞在体内的增殖和血管新生。
|
