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表达rhTNFR-Fc的CHO细胞的氨基酸代谢特征及氨基酸流加培养工艺研究
引用本文:唐治华,应跃斌,江海燕,黄敏芬,罗家立,陈枢青.表达rhTNFR-Fc的CHO细胞的氨基酸代谢特征及氨基酸流加培养工艺研究[J].药物生物技术,2008,15(1):35-39.
作者姓名:唐治华  应跃斌  江海燕  黄敏芬  罗家立  陈枢青
作者单位:1. 浙江大学药学院,浙江,杭州,310031
2. 浙江海正集团技术中心,浙江,台州,318000
摘    要:为提高表达重组人肿瘤坏死因子受体-Fc融合蛋白(rhTNFR-Fc)的CHO工程细胞的培养密度和目的蛋白表达,研究了葡萄糖和谷氨酰胺流加-批式培养工艺的细胞氨基酸代谢特征及游离氨基酸和大豆蛋白水解物的补加策略.通过补加葡萄糖和谷氨酰胺浓缩液分别维持其浓度为10 mmol/L和2 mmol/L左右,在不同阶段定期补加特定的氨基酸浓缩液或大豆蛋白水解物补充氨基酸消耗,检测细胞培养上清中rhTNFR-Fc的表达.谷氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、脯氨酸等4种非必需氨基酸快速消耗,是CHO工程细胞增殖和目的蛋白表达的限制性底物.以游离氨基酸、游离氨基酸合并大豆蛋白水解物补充氨基酸消耗可分别使细胞生长密度提高50%、100%,目的蛋白表达增加60%、125%,培养时程延长44%、66%,同时葡萄糖比消耗率、乳酸比生成率降低,谷氨酰胺的利用效率提高.

关 键 词:重组人肿瘤坏死因子受体-Fc融合蛋白  CHO细胞  氨基酸  流加-批式  代谢  表达  细胞增殖  非必需氨基酸  代谢特征  流加培养  工艺研究  Strategies  Supplement  Amino  Acid  CHO  Cells  Metabolism  效率提高  利用  生成率  酸比  消耗率  延长  时程  生长密度  可分
文章编号:1005-8915(2008)01-0035-05
收稿时间:2007-08-20
修稿时间:2007-11-08

Amino Acid Metabolism of CHO Cells Expressing rhTNFR-Fc and Amino Acid Supplement Strategies
TANG Zhi-hua,YING Yue-bin,JIANG Hai-yan,HUANG Min-fen,LUO Jia-li,CHEN Shu-qing.Amino Acid Metabolism of CHO Cells Expressing rhTNFR-Fc and Amino Acid Supplement Strategies[J].Pharmaceutical Biotechnology,2008,15(1):35-39.
Authors:TANG Zhi-hua  YING Yue-bin  JIANG Hai-yan  HUANG Min-fen  LUO Jia-li  CHEN Shu-qing
Abstract:
Keywords:TNFR-Fc  CHO cells  Fed-batch  Amino acid  Metabolism
本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录!
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