| B型流感病毒B/Guangzhou/01/2007株HA基因重组3型腺病毒的构建 |
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| 作者姓名： | 鲁俊鹏 田新贵 罗满林 李海涛 周志超 周荣 |
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| 作者单位： | 1. 华南农业大学兽医学院,广东,广州,510642;广州市儿童医院中心实验室,广东,广州,510663
2. 广州市儿童医院中心实验室,广东,广州,510663
3. 华南农业大学兽医学院,广东,广州,510642 |
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| 摘 要： | 目的:构建包含有B型流感病毒B/Guangzhou/01/2007株血凝素(HA)基因的重组3型腺病毒.方法:用PCR方法扩增得到HA基因, 酶切后克隆至3型腺病毒穿梭质粒pSK-CMV, 构建重组穿梭质粒pSK-CMV-HA, 然后在大肠杆菌BJ5183内进行经 Not I和 Eco R V线性化的pSK-CMV-HA和经 Rsr Ⅱ线性化的骨架质粒pBRAdV3△E3的同源重组, AsiS I酶切线性化重组腺病毒质粒pBRAdV3△E3-HA后脂质体法转染HEp-2细胞, 进行病毒包装和增殖后得到重组腺病毒rAdV3△E3-HA, 并且通过病变观察、扫描电镜、 RT-PCR、免疫细胞化学方法对基因组的包装和HA基因的表达进行检测.结果:将HA基因克隆入pSK-CMV获得重组穿梭质粒pSK-CMV-HA, 线性化的pSK-CMV-HA与pBRAdV3△E3同源重组后获得pBRAdV3△E3-HA, 线性化的pBRAdV3△E3-HA转染HEp-2细胞观察到细胞病变和HA基因的表达.结论:成功构建了带有HA基因的重组腺病毒rAdV3△E3-HA, 为B型流感病毒-3型腺病毒二联活苗的研究提供了依据.
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| 关 键 词： | B型流感病毒 HA基因 重组腺病毒 |
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